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取上述200μL细胞液加入小室,下室(培养板)加入900L含有10% FBS的培养基。不同规格的小室和培养板所加的体积不同,具体参考Millicell®产品说明书。37°C孵育24至72小时,依据**细胞类型而定。孵育结束,小心取出细胞小室,吸掉小室上层培养液,PBS清洗一遍,70%酒精或者4%多聚甲醛固定5min,0.5%结晶紫(2%乙醇或PBS溶解)染色20min,然后进行第8步或者第9步。PBS清洗两次以去除多余的染料,立即用棉签擦去滤膜上层的细胞,自然静置风干。显微镜下观察滤膜下层的细胞,随机选取不同的视野计数并算平均值。结晶紫溶解滤膜下层细胞,然后用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm读取OD值。这种方法可以避免视野下细胞穿透不均匀带来的误差。上海益启生物的培养基询价公司电话。
每一个孔底部边缘上有一个小平台,移液管的前列在实验操作中不会接触到孔的膜面,从而避免了对细胞单层的意外碰触。 独特设计避免气泡形成 一个特别设计的泪珠状孔降低了在滤膜板下面形成气泡的机率,这种气泡一旦形成将会能影响细胞供养。单孔饲养板上设有缓冲隔板,能够防止培养液的渗漏和交叉污染。 专门的端口使从基底外侧加液更加容易 获得**的顶部和基底外侧加液口提供了接触细胞单层的无污染通道。同时它们也简化了细胞种植、更换培养液和样品分析等一系列程序。上海益启生物公司干细胞培养的优势。金山区干细胞培养细胞培养订购
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