广州mts检测细胞增殖率

时间:2021年09月19日 来源:

 产品特色:

  1. 比MTT,XTT,MTS和WST-1检测更为灵敏;

  2. 对细胞无毒性,对后续实验没有影响;

  3. 操作步骤简单、便捷。

  使用方法:

  1. 在96孔细胞培养板中配制100μl的细胞悬液,将培养板在培养箱预培养24小时;

  2. 向培养板中加入定量不同浓度的待测物质(若直接测定细胞活性,直接从第四步操作);

  3. 在培养箱中培养一段时间;

  4. 向每孔加入10ul的溶液并在培养箱培养1小时至4小时

  5. 用酶标仪测定450 nm处的吸光度。

    注意事项:

  1. 确保***和CCK-8均匀分布在培养基中;

  2. CCK-8测定是基于活细胞中的脱氢酶活性,影响脱氢酶活性的条件或化学物质可能导致实际活细胞数与使用CCK-8测定活细胞数之间有差异;

  3. 如果细胞培养时间较长,培养基颜色发生变化,应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测;

  免责声明: 本公司将不为任何不正常使用此产品时所发生的意外负责。

  储存条件:

  冰袋运输。在2-8°C避光。 CCK-8检测原理是高水溶性的四唑盐WST-8在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料。广州mts检测细胞增殖率

上海儒安生物科技有限公司转膜液

产品简介:

我们生产的Western转膜液(Western Transfer Buffer)可以用于Western时湿法电转膜,是一种快速效率高的特有配方转膜液,效果较好。

1、转印快速——室温转膜,20-30 分钟内将蛋白转移到印迹膜上。

2、转印效率高——产生热量非常小,减少蛋白损失。

配置灵活——配置1*转膜液时加入无水甲醇、无水乙醇均可,效果没有明显差异,兼容性好。

使用方法:

 1* 快速转膜液的配制(1000 ml):

 取100ml 此产品+800 ml 去离子水+100ml甲醇。



电转仪的设置:

一个转印槽:电压:110V,  电流:400mA;

二个转印槽:电压:140V,电流:700mA;

100kD 以下蛋白,胶浓度<10%的,转印时间20分钟即可转印完毕。

100kD 以上蛋白,胶浓度≥10%的,转印时间30分钟即可转印完毕。 广州mts检测细胞增殖率CCK法的重复性优于MTT法.

内参抗体

β-Tubulin-HRP Mouse mAb


1.产品简介

    微管蛋白是有丝分裂器、纤毛、鞭毛和细胞骨架的组成部分,主要由2种可溶性蛋白组成,α-tubulin和β-tubulin,分子量均约为55 kDa。β-tubulin抗体可作为Western Blot中的内参对照。但要注意的是,β-tubulin在某些细胞中的表达可能也不稳定。例如在脂肪组织中β-tubulin的表达量非常低,因此对于这些组织就不能用β-tubulin作为内参对照。

2.产品特点

▪用于WB实验,性价比高,推荐稀释比例为:1:1000 - 1:10000

▪常备现货

3.结果示例

β-tubulin-HRP小鼠单抗经1:1000(泳道1) 、1:2000(泳道2)

和1:4000(泳道3)梯度稀释,对Hela细胞裂解物进行Western Blot分析。




使用该产品比使用沉淀比色HRP底物检测所需的抗体浓度低。为优化抗体浓度,请进行一次系统的点印迹分析;

工作液在室温下8小时内可以保持稳定,但是应该避免暴露在阳光下或任何其他强光环境,然而短期实验室照明强度不会破坏工作液的稳定性;

封闭试剂有可能与抗体产生交叉反应,导致出现非特异性信号。封闭缓冲液同时也会影响系统的灵敏性,当从一种底物转换为另一种底物时,有时会出现信号衰减或背景增加的现象,原因可能是封闭缓冲液不适合新的检测系统;

使用亲和素/生物素检测系统时,避免使用牛奶作为封闭试剂,因为牛奶中含有不定量的内源性生物素,会导致高背景信号;

保证洗涤缓冲液、封闭缓冲液、抗体溶液和底物工作液的使用体积,以确保在整个实验过程中印迹膜完全被液体覆盖,避免膜变干。增大封闭缓冲液及洗涤缓冲液的使用量可以降低非特异性的信号; 从环境中和有机体中,寻找控制细胞增殖的“因子”,并阐明它们的作用机制。

Q:CCK-8能否用于细胞染色?

A:CCK-8不能用于细胞染色,CCK-8检测原理是高水溶性的四唑盐WST-8在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料,WST-8及formazan是高度水溶性的,不会进入细胞内对细胞进行染色。

Q:没有450 nm的滤光片,能否使用其他滤光片?

A:如果您没有450 nm滤光片。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之间的滤光片, 450 nm滤光片具有比较好灵敏度。

Q:哪些物质会干扰CCK-8的测定?

A:WST-8可能与还原剂反应生成WST-8 formazan,如果使用还原剂(例如一些抗氧化剂)会增加OD值;若存在氧化性物质则会阻挡CCK-8测定反应,减小OD值;此外,培养基中的酚红不会影响实验结果,酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 CCK法的检测灵敏度很高,甚至可以测定较低细胞密度.广州mts检测细胞增殖率

细胞是生命活动的基本单位。像生物体那样,也以经过生长、发育、衰老等这几个阶段。广州mts检测细胞增殖率

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