绍兴细胞培养用胎牛血清
胎牛血清:胎牛血清用于细胞培养已经超过半个世纪了,20世纪50年代末TheodorePuck在细胞和组织培养中初次加入胎牛血清(FBS)来刺激细胞生长。后来人们发现,由于胎牛未进食过母乳,所以IgG的含量极低,不会阻碍细胞生长,而且胎牛血清中含有丰富的促进细胞生长的成分,如维生素、运输蛋白、微量元素、生长因子等,胎牛血清生产的一切环节均有严格的质量把控。出厂的血清无细菌、支原体和病毒等微生物的威胁,且内的毒性含量低,满足绝大多数细胞培养需求。解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。绍兴细胞培养用胎牛血清
选购FBS应考虑哪些标准?产品检测,每款FBS在生产上市之前,必须经过严格的质控检测。质控环节必不可少,以确保上市的血清符合规定合乎规格,而血清产品分析证书(COA)就是FBS质控的重要体现。在COA中,常规的检测指标包括内的毒性、总蛋白、细菌、病毒等,另外总蛋白为30-50mg/mL、血红蛋白检测不高于30mg/dL。质量验证我们使用FBS目的是为了让细胞更真实、健康地生长。在确保了FBS的来源真实性、安全可靠性后,下一步就要对FBS的质量,即培养细胞的效果进行鉴定了,而这也是决定细胞能否养好的关键。珠海标准胎牛血清供应商血清有免疫,维持酸碱平衡和渗透压的作用,血清蛋白质亦可储备供给机体蛋白质不足时的应用。
胎牛血清都有哪些重要的指标:一、内的毒性,内的毒性是革兰氏阴性菌的细胞壁外壁层上的特有成分。当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时,才表现其毒性。内的毒性直接参与细胞凋亡,血清中内的毒性含量越低,对细胞毒性越小,越利于细胞的生长和传代;内的毒性含量过高,会直接导致细胞提前老化。国际上规定,胎牛血清的级别,应以内的毒性水平的高低来确定,其中,特级胎牛血清的内的毒性应<10EU/ml。二、血红蛋白含量,胎牛血清的颜色会根据血红蛋白含量的不同表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色等。细胞培养用血清的标准是血红蛋白含量不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高;反之,数值越低。实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响。这个指标的意义在于能体现出采的血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
胎牛血清FBS的处理方法?胎牛血清FBS一般需要冷冻保存,在-5到-20°C之间,并且可以在2到8°C的温度下解冻。将血清等分并冷冻在较小的部分(通常为50ml试管)中通常很有用,以避免多次冷冻和解冻循环。有时,一些FBS等分试样在冷冻温度下仍保留在液体中。这是由于缺乏用于开始结晶(冷冻)的成核中心(颗粒物质)。如果您只是用手指轻弹管子,它们通常几乎会立即凝固。解冻后有一些沉淀是很常见的。沉淀物,可能是由于某些血清蛋白的变性,可以通过短暂的离心来清理,这通常不会影响血清的质量。血清应保存在-5℃至-20℃,然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。
如何区别真假胎牛血清:1、血红蛋白,标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。2、pH,国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。3、微生物。包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性的病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清理。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清理,但对血清质量影响不大。病原性的病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。血清指在血浆中除去纤维蛋白原及某些凝血因子后分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原已被除去的血浆。珠海标准胎牛血清供应商
血清在溶解过程中必须规则地摇晃均匀。绍兴细胞培养用胎牛血清
胎牛血清制备:离心,将准备好的瓶放入离心套筒调好平衡后,对称放入离心机,按1800转/分钟离心50分钟后,放入4℃冷库备用。抽血清,取出4℃冷库离心好的瓶,注意轻抬轻放,以免将下层血块和血清混层。将经过高压灭菌装有两孔瓶塞的5000ml大瓶的抽气孔一端的管子接好空气滤器,再接到压缩机抽气口上。打开压缩机,用抽血清孔的管子轻轻抽取采的血瓶内的上清液,注意控制好抽管,避免抽到下层血块。将抽好的血清分装,即为粗制胎牛血清,放入-20℃冷库冷藏备用。绍兴细胞培养用胎牛血清
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