沈阳brdu检测细胞增殖因子

时间:2021年10月10日 来源:

Q:CCK-8能否用于细胞染色?

A:CCK-8不能用于细胞染色,CCK-8检测原理是高水溶性的四唑盐WST-8在电子耦合试剂存在下还原产生水溶性formazan形式的染料,WST-8及formazan是高度水溶性的,不会进入细胞内对细胞进行染色。

Q:没有450 nm的滤光片,能否使用其他滤光片?

A:如果您没有450 nm滤光片。您也可以使用吸光度在430 nm和490 nm之间的滤光片, 450 nm滤光片具有比较好灵敏度。

Q:哪些物质会干扰CCK-8的测定?

A:WST-8可能与还原剂反应生成WST-8 formazan,如果使用还原剂(例如一些抗氧化剂)会增加OD值;若存在氧化性物质则会阻挡CCK-8测定反应,减小OD值;此外,培养基中的酚红不会影响实验结果,酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去。 CCK-8的检测操作更简单,无需有机溶剂.沈阳brdu检测细胞增殖因子

CCK-8试剂中含有WST–8:化学名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐,它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲臜产物(Formazan)。生成的甲臜物的数量与活细胞的数量成正比。用酶联免疫检测仪在450nm波长处测定其光吸收值,可间接反映活细胞数量。该方法已用于一些生物活性因子的活性检测、大规模的筛选、细胞增殖试验、细胞毒性试验以及药敏试验等。沈阳brdu检测细胞增殖因子细胞增殖是生物体的重要生命特征,细胞以分裂的方式进行增殖。

细胞增殖周期细胞各组成部份在不断发展变化的基础上还要不断增殖,产生新细胞,以代替衰老、死亡和创伤所损失的细胞,这是机体新陈代谢的表现,也是机体不断生长发育、赖以生存和延续种族的基础。细胞各组成部份在不断发展变化的基础上还要不断增殖,产生新细胞,以代替衰老、死亡和创伤所损失的细胞,这是机体新陈代谢的表现,也是机体不断生长发育、赖以生存和延续种族的基础。细胞以分裂的方式进行增殖,每次分裂后所产生的新细胞必须经过生长增大,才能再分裂。现在把细胞增殖必须经过生长到分裂的过程称为细胞周期。换句话说,细胞增殖周期(或细胞周期)是指细胞从一次分裂结束开始生长,到下一次分裂结束所经历的过程。细胞增殖周期可分为两个时期,即间期和分裂期。

细胞增殖的过程包括物质准备和细胞分裂,细胞分裂的间期也是进行物质准备,这两个物质准备有什么区别?

细胞bai的增殖是靠细胞而du分裂来实现的。所以这两个只是说法zhi不同而已,物质准dao备为DNA的复制,和蛋白质的合成。

细胞以分裂的方式进行增殖,细胞增殖就是细胞分裂。自然两个物质准备是相同的了……

细胞分裂之前,物质准备就是DNA的复制,和蛋白质的合成

细胞增殖=物质准备+细胞分裂;细胞分裂=分裂间期(为分裂期做物质准备)+分裂期.




机体创伤愈合、组织再生、病理组织修复等,都要依赖细 胞增殖。

Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)是由日本同仁化学研究所(Dojindo)开发的检测细胞增殖、细胞毒性的试剂盒,为MTT法的替代方法,试剂盒中采用自己开发的水溶性四唑盐-WST-8,在日本,美国,欧洲等国家地区均持有**,同仁化学研究所于2006年在中国获得了WST-8的注册商标。

CCK-8法与普通的MTT法相比,具有特点:

★灵敏度高,数据可靠,重现性好

★操作简便,省时省力

★水溶性,不需要换液,尤其适合于悬浮细胞

★无需放射性同位素和有机溶剂,对细胞毒性低

★为1瓶溶液,毋需预制,即开即用

★适合于高通量筛选

CCK-8用途:筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、药敏试验

CCK-8试剂盒在国内**科研院所、重点大学、三甲医院被广泛应用,国际认可度高,使用CCK-8发表的中外文献达600多篇,其中截止08年底SCI影响因子IF>10分的论文有37篇,比较高IF26.5分。 上海细胞增殖公司哪家强?沈阳brdu检测细胞增殖因子

CCK-8法的重复性优于MTT 法。沈阳brdu检测细胞增殖因子

抗体稀释参考一抗稀释范围为1mg/mL原液1:1000-1:5000或0.2-1.0µg/mL,二抗稀释范围为1mg/mL原液1:2000-1:10000或10-50ng/mL注意事项 1.为获得比较好效果,在孵育步骤请使用摇床;  2.将Tween20(终浓度0.05-0.1%)加入封闭缓冲液和稀释的抗体溶液,以降低非特异信号;  3.不要使用叠氮钠作为缓冲液的防腐剂,叠氨钠是HRP的***物;  4.避免手与膜直接接触,实验过程应戴手套或使用干净的镊子;  5.所有设备必须清洁且不沾染外来物质,金属器械(如剪刀)不得具有可见的锈迹,锈迹可能导致斑点形成和高背景。沈阳brdu检测细胞增殖因子

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