外泌体分离方法

外泌体作为药物递送载体较以往的合成系统具有多方面的优势，比如：人工递送载体具有更低的免疫原性，其含有的磷脂双分子层可与靶细胞细胞膜融合，从而避廉价核巨噬细胞系统的吞噬作用。Srivastava等开发了一种基于外泌体-金奈米粒子（Exo-GNP）的药物递送系统—“nanosomes”用于肺病的医治，研究表明该系统与单用多柔比星医治相比，前者的多柔比星释放量增加、摄取率提高、化疗毒性降低且化疗效果增强。此外，还有研究发现，使用外泌体运载紫杉醇（PTX）可显着提高病细胞对PTX的吸收，将PTX加载至外泌体中显着增加了药物细胞毒性，Exo-PTX能显着压制肺病的发展。从症状患者树突状细胞释放的外泌体中，含有各种症状细胞来源的蛋白质。外泌体分离方法

外泌体是具有双层脂膜的囊泡结构,其稳定性较好,可保护内部生物分子免受体液中各种酶的影响,从而保持其完整性和生物活性。外泌体被提取后一般悬浮于磷酸盐缓冲液。目前,常用的储存方法为冷冻保存,但是冷冻保存可能会导致外泌体形状与物理性质的改变,也可能导致多层囊泡的形成和聚集,反复冻融会导致外泌体表面分子的生物特性、含量和标志物组成发生变化。血清中包含外泌体在内的细胞外囊泡DNA在不同储存环境可保持稳定,血浆存放于4°C时其RNA会明显降解,在–20°C下长期保存也会导致血浆中外泌体总RNA降解,但miRNA却十分稳定,这也提示了外泌体miRNA作为生物标志物的潜力。细胞上清外泌体提取试剂盒应用外泌体与各种疾病的相关性被检测出，特别是血液中释放的病细胞来源的外泌体。

虽然外泌体作为药物载体具有生物兼容性、稳定性和内在靶向性等潜在优势，但是外泌体在药物递送中的应用研究才刚刚起步，尚有许多问题需解决：选择何种细胞作为外泌体的供体：如DCs来源的外泌体可用于免疫治理，因其富含组织相容复合物（MHC）及T细胞共刺激分子，能在体内唤醒T淋巴细胞，进而抑制瘤细胞增殖；骨髓来源的间充质干细胞（MSCs）来源的外泌体对KRAS基因有抑制作用；γδT细胞、自然杀伤细胞（NK）、瘤细胞等均有研究报道可作为载药级别外泌体的细胞来源。

作用机制主要是旁分泌的间充质干细胞（MSC）被普遍地用于医治各种人类疾病。已经证明没有一个因素足以调解MSC的医治效果。然而，由许多细胞（包括MSC）分泌的外泌体膜囊泡是有吸引力的候选物作为其功效的载体。外泌体可以运输和运送大量的蛋白质、脂质和核酸，并可以改变细胞和身体部位的功能。除了作为细胞间通讯的关键作用之外，外泌体越来越多地被认为是疾病的生物标志物和预后因子。此外，它们有潜力被用作临床应用基因和药物递送的载体。该文回顾了外泌体的生物发生、分子组成及其作为细胞间通讯的信使的作用，着重于其作为干细胞医治的载体的潜力。外泌体可以作为药物治理的递送系统。

在利用外泌体运输PTX进行抗中流的研究中，由于间充质干细胞可以归巢(homing)至中流细胞微环境并且可以不通过基因操作即可对PTX运输，因此Pessina等采用间充质干细胞SR4987作为分泌外泌体的母代细胞，而后将SR4987与PTX共混，使SR4987分泌的外泌体含有PTX，再利用超速离心法将载有PTX的外泌体分离出来，研究其对体外人胰腺ai细胞株的影响。结果表明外泌体可以有效的运载PTX并不破坏其功能，小泡(主要指外泌体)溶液的蛋白质浓度在0.047～0.095mg/mL之间时可以诱导中流细胞凋亡50%，这种抑制效果与纯PTX对体外ai细胞的抑制效果相当。人体内多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体，包括干细胞、免疫细胞、内皮细胞、及平滑肌细胞等。超速离心外泌体 离心管

外泌体作为细胞间信号传导的通讯工具和作为病等各种疾病的生物标记话题比较热门。外泌体分离方法

目前，在各种健康与疾病模型中都发现，外泌体通过分子信息传递扮演着重要的角色。外泌体还越来越多地被认为是疾病的生物标志物和预后因子，具有重要的临床诊断和治理意义。除此之外，它们还有潜力被用于临床，作为基因和药物递送的载体。健康人和多种疾病的患者会将含有不同RNA和蛋白质成分的外泌体释放到体液循环中，因其特殊性，外泌体可以作为生物标志物来对疾病进行检测。例如，从血液或尿液中分离的外泌体可以用作病症、心脏病的诊断和预后的指标。外泌体分离方法