EndoC-BH1糖尿病细胞模型批量化生产且纯度高
Human Cell Design的细胞模型通过多轮优化和严格的质量控制,确保每一批次的细胞都具备高度的均一性和功能性。这些细胞不仅能够在体外条件下长期稳定生长,还能够在高通量筛选实验中表现出色,为研究人员节省了大量时间和资源。HCD 的产品已成为许多科学家进行糖尿病研究和药物筛选的工具。 Human Cell Design 不断推动技术创新,致力于为糖尿病研究提供先进的细胞模型。其开发的 EndoC-BH5 细胞系不仅具有优异的胰岛素分泌功能,还能够模拟胰岛细胞的代谢反应,为研究糖尿病的病理机制提供了重要的实验平台。通过与全球的科研机构合作,HCD 不断优化其产品和服务,满足科学家们不断变化的研究需求。糖尿病细胞模型人B细胞系,用慢病毒载体整合了SV40大T抗原 (SV40-LT) 和人端粒酶逆转录酶(hTERT) 两种转基因。EndoC-BH1糖尿病细胞模型批量化生产且纯度高
EndoC-βH5细胞是一种新型人类胰腺β细胞解决方案,可用于开发人类糖尿病模型以及药物筛选和验证平台,产生流程为:DNA构建,慢病毒载体产生,人胎儿胰腺外植体与pTRIPDU3loxP-pY-TK-RIP405-SV40-LT和pTRIPDU3loxPpY-TK-RIP405-hTERT慢病毒载体共转导,移植到SCID小鼠的肾囊下,导致八个月后形成胰岛素瘤,从而获得EndoC-βH5。EndoC-βH1和增殖的EndoC-βH5细胞分别在Opti-β1和Ulti-b1培养基中的βCoat涂层塑料板上培养。使用胰蛋白酶(0.05%)每7天繁殖一次细胞。流式细胞术分析表明所有EndoC-βH5细胞均呈胰岛素阳性,并且在绝大多数细胞中检测到PDX1和NK6.1表达(分别为92.3%和90%)。EndoC-βH5细胞在涂层塑料上形成小的贴壁簇。II型糖尿病糖尿病细胞模型流氏分析和免疫荧光分析糖尿病细胞模型EndoC-BH5 细胞以 1e2 105 细胞/孔接种到 BCoat包被的8 孔 IBIDI 室载玻片上。
EndoC-βH1使用慢病毒介导的基因转移从人类胎儿胰腺中产生功能性β细胞,这些胰腺处于发育的早期阶段,即9至11周,这段时间与β细胞分化的开始相吻合(33)。整合的转基因SV40LT受大鼠胰岛素启动子控制,在胰岛素阳性细胞中特异性表达。通过使用这种靶向方法,SV40LT在新形成的β细胞中表达,同时这些细胞头次产生胰岛素。因此,我们成功地模仿了用于产生功能性啮齿动物β细胞系的转基因方法(7,8,34),用于从人胎儿胰腺中开发功能性人β细胞系。
Human Cell Design 成立于 2001 年,总部位于法国,专注于人源细胞模型开发,以助力科研和生物医药企业的发展。其中可作为糖尿病细胞模型的 EndoC-BH5、EndoC-BH3、EndoC-BH1 等人源胰岛 B 细胞为其优势产品,这些人源胰岛 B 细胞诱导产生的胰岛素接近于天然胰岛细胞分泌的胰岛素量。人源胰岛 B 细胞模型构建技术性文章早期发表于 2011 年,相关文章总引用量达到 600+,人源胰岛 B 细胞模型已经被全球 200 多家生物医药和生命科研机构作为糖尿病细胞模型使用。与 EndoC-BH1 细胞相比,EndoC-BH5 细胞与原代人 B 细胞更接近。
根据从啮齿动物β细胞获得的数据来看,葡萄糖转运蛋白SLC2A2头次被认为是葡萄糖感知的主要决定因素,而后来的研究表明,葡萄糖激酶(GLK)是主要决定因素。在人类β细胞中,GLK被认为是葡萄糖感知的主要决定因素。为了克服这些限制,在HumanCellDesign中生成了新的β细胞系。EndoC-βH1是通过将表达SV40LT的慢病毒载体转导到人类胎儿胰腺芽中来开发的。随后将转导的芽移植到SCID小鼠体内,生成的表达SV40LT的细胞增殖并形成胰岛素瘤。表达 EndoC-BH5 细胞的修饰 HLA-A2 引发特异性 A2 同种异体反应性 CD8 T 细胞。天然胰岛B细胞糖尿病细胞模型高通量筛选
EndoC-BH1 和增殖的 EndoC-BH5 细胞分别在 Opti-B1 和 Ulti-b1 培养基中的 BCoat涂层塑料板上培养。EndoC-BH1糖尿病细胞模型批量化生产且纯度高
Humancelldesign构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3,EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。通过多轮次优化改良,获得的功能胰腺B细胞,无限接近天然人源胰岛B细胞,其胰岛素分泌功能与天然细胞类似,基于PDX1/NKX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上,在2.8mMand11mM葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应,对GLP-1R激动剂,Exendin4刺激产生明显增强,且可实现批量化生成,实现稳定供应。此外Humancelldesign开发系列人源胰岛B细胞模型EndoC-BH5的同时,开发了配套的细胞培养试剂,可用于细胞培养和后续相关实验。EndoC-BH1糖尿病细胞模型批量化生产且纯度高
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