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卵巢早衰(pof)是指女性40岁前以闭经、不育、雌***缺乏及促性腺***水平升高为特征的一种疾病。一般人群中发病率为1%~3%,在继发性闭经妇女中占4%~8%,在20岁以前的发病率为%。近年来pof在育龄妇女中的发生率有逐年升高且向年轻化发展的趋势,由于卵巢早衰患者卵巢分泌的雌***量减少,即可导致一些其他疾病,如骨质疏松、泌尿生殖道萎缩、脂质代谢紊乱、心血管疾病。顺铂又称顺氯氨铂、氯氨铂、ddp、锡铂,是目前常用的金属铂类络合物,在分子中铂原子对其抗**作用有重要意义。但只有顺式才有意义,反式无效。其可与dna链交叉连接,显示出细胞毒作用。溶解后在体内无需载体转运,即可通过带电的细胞膜。由于细胞内氯离子浓度低(4mmol/l),氯离子为水所取代,电荷呈阳性,具有类似烷化剂双功能基团的作用,可与细胞核内dna的碱基结合,形成三种形式的交联,造成dna损伤,破坏dna复制和转录,高浓度时也抑制rna及蛋白质的合成。顺铂具有抗*谱广、乏氧细胞有效、作用性强等优点,已普遍用于***睾丸*、卵巢*、子宫*、膀胱*、颈部*、前列腺*、脑*等,疗效***。但顺铂用于****有一定的毒性,会引起副作用,与卵巢的损害有直接关系,有研究表明顺铂可诱导卵巢细胞凋亡。能够准确模拟人相关特定功能与疾病特征。心血管疾病疾病动物模型建模供应商
实验期间每天进行阴道涂片,观测动情周期变化。进一步地,检测***水平是指:检测雌***(e2)、促卵泡生长素(fsh)和促黄体生成素(lh)的水平。进一步地,检测对比卵巢重量是指:比较各组大鼠双侧卵巢脏器系数。进一步地,阴道涂片是指:采用阴道脱落细胞涂片法,使用染色剂为亚甲基蓝。本发明利用顺铂成功地建立了大鼠卵巢早衰模型,为基础研究建立稳定的卵巢早衰动物模型奠定了良好的基础。本发明使用的各种术语和短语具有本领域技术人员公知的一般含义。提及的术语和短语如有与公知含义不一致的,以本发明所表述的含义为准。附图说明图1:e2水平检测结果示意图。图2:fsh水平检测结果示意图。图3:lh水平检测结果示意图。图4:大鼠体重检测结果示意图。宝山区哪一家疾病动物模型建模明确研究疾病的独特资源确定小鼠疾病模型的初步选择。
来源:ZSCI基础研究中如果加入动物实验部分则使得研究更加趋于完善,投稿时中稿率也相应会增加。但将动物实验做好却不是一件容易的事情。这篇文章主要讲动物模型的构建技术,把骨科、糖尿病相关的动物模型构建做了一个***的技术汇总,建议先码后读,文章内容有部分做了简化,想看详细讲解可以在文末获取课件!一、骨科相关动物模型1.骨关节炎1)骨关节炎模型构建方法(诱发性)-关节腔内手术法、关节腔注射法。2)模型评分标准①SafraninO染色与OARSI评分(PMID:31046827、30942801)②HE染色与OARSI评分(PMID:30609097)③SafraninO染色与Mankin评分(PMID:30609097)2.骨质疏松症1)骨关节炎模型构建方法去趋法模型PMID:31037128实验动物:小鼠方法:在戊巴比妥麻醉下进行双侧卵巢切除术以诱导骨质疏松症,同时对照组小鼠*进行卵巢外置但未切除。2)模型检测指标(PMID:31037128)①HE染色②Micro-CT③TRAcP染色④Micro-CT相关指标检测3.类风湿性关节炎类风湿性关节炎(RA)是一种慢性自身免疫性疾病状态,其特征是滑膜增生,软骨退化和脊椎关节的骨侵蚀4.强直性脊柱炎1)强直性脊柱炎模型构建方法2)模型检测指标。
pirb的mrna和蛋白表达水平***增加。在cns,pirb是髓鞘抑制因子nogo-a、mag、omgp的受体,参与神经元突起芽发和生长锥塌陷,抑制神经元轴突再生和突触可塑性。pirb的细胞外免疫球蛋白结构域(d3-d6)介导了pirb与nogoa的结合。近年来关于阿尔茨海默病(alzheimer’sdisease,ad)研究还发现,pirb是aβ42寡聚体的高亲和力受体,亲和力达到纳摩尔水平。pirb的前两个细胞外免疫球蛋白结构域(d1-d2)介导了aβ42寡聚体和pirb的相互作用,导致丝切蛋白(cofilin)信号通路****组织化学染色结果发现。通过小鼠疾病模型的构建有助于我们深入揭示潜在致病基因作用机制。
步骤3、pmsg处理c57bl/6雌性小鼠(6周龄,平均体重20g),46h后注射hcg,与雄性小鼠合笼交配,次日取受精卵进行显微注射,将步骤1的grna1、grna2、cas9蛋白以及线性化后的打靶载体一起注射到受精卵中,取注射后存活的受精卵移植到假孕母鼠体内,产出小鼠,即f0代小鼠。上述步骤中grna1、grna2的浓度均为2~10pmol/ul,cas9蛋白的注射浓度为30~100ng/μl,cas9蛋白购自newenglandbiolabs,货号为m0386m。步骤4、提取f0代小鼠尾部dna,pcr扩增产物测序,鉴定是否为嵌合体。本发明用于f0代小鼠pirb基因pcr鉴定的特异性引物如下:pcrprimers1(℃):5’armforwardprimer(f1):5’-tacgccacagggagtccaagaatg-3’5’kireverseprimer(r1):5’-gatggggagagtgaagcagaacg-3’pcrprimers2(℃):3’kiforwardprimer(f2):5’-ctgctgtccattccttattccatag-3’3’armreverseprimer(r2):5’-ctggaaatcaggctgcaaatctc-3’。primers1对应的扩增产物大小为,primers2对应的扩增产物为。用于f0代小鼠测序的引物如下:sequencingprimerforpcrproduct1:5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer。收集研究疾病的生物学信息资料。心血管疾病疾病动物模型建模厂家
构建人源移植瘤模型需要合适的免疫缺陷小鼠想知道如何选择?心血管疾病疾病动物模型建模供应商
诱发性**模型的原理是利用外源性致*因素引起细胞遗传特性异常而呈现出异常生长和高增殖活性,形成**。致*因素主要有化学性、物理性及生物性致*物,而化学性致*物(chemicalcarcinogens)**常见,已确知的多达一千余种,用于诱发实验性**的种类亦很多,如苯并萨,申基胆菌、联苯胺、亚硝胺类、黄曲霉***类。各种致痒物的致*强度、致*谱等特性相差较大,同一种致*物经不同途径给药所致**部位或类型可有很大差异。有些化学性致*物具有明显的亲***或组织特性。因此,实验工作中应根据需要选用适当致*物和致*途径,并确定其他影响因素或实验条件。基本原理:利用外源性致*物引起细胞遗传特性改变,从而出现异常生长和高增殖活性细胞形成**。外源性致*物主要有化学性、物理性(如放射性物质)及生物性(如诱发动物**的病毒),其中以化学性致*物**为常用心血管疾病疾病动物模型建模供应商
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