PYG培养基

要获得微生物纯培养，必须避免杂菌污染，因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言，更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌，一般培养基用1.05kg/cm2，121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中，长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖，因此含糖培养基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分钟进行灭菌，某些对糖类要求较高的培养基，可先将糖进行过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合。GYM淀粉琼脂 GYM淀粉肉汤 菌种储备用琼脂培养基 M-PA-C琼脂 洋葱伯克霍尔德菌选择性琼脂基础。PYG培养基

细胞培养过程中，细胞培养基是不可或缺的，细胞培养基既是培养细胞中供给细胞营养和促使细胞生殖增殖的基础物质，也是培养细胞生长和繁殖的生存环境。通常细胞体外培养时需要加入血清，以维持细胞的生长和存活。而除了血清之外，部分细胞在培养过程中需要添加胰岛素和β-巯基乙醇（β-mercaptoethanol）等成分来维持细胞状态。MCF-7和NIH:OVCAR-3等细胞需要额外添加胰岛素，而Thp-1和MC3T3-E1 subclone 14等细胞则需要添加β-巯基乙醇，不同细胞加入量会有差异，需根据细胞类型判断。胰膘肉汤使用说明称取本品21.5g于1L蒸馏水或去离子水中加热煮沸至完全溶解分装115℃高压灭菌30分钟冷却备用.

培养细胞时应使用5%还是10%CO2，或者根本没有影响？一般培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中 NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。NaHCO3的作用：培养基中使用了 NaHCO3-CO2 缓冲系统，并采用开放培养，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，再通过稳定调节温箱中CO2浓度（5%） ，与培养基中的NaHCO3处于平衡状态，从而调节培养基的PH值。NEAA：非必须氨基酸，NEAA（非必需氨基酸） 是含几种非必需氨基酸的合剂，添加到的原培养基不同，NEAA 也有不同的种类，比如添加至MEM的NEAA，含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。

按培养基的营养成分是否完全区分：1.基本培养基，亦称“较低限度培养基”。只能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基，称为基本培养基，是含有营养要求较低成分的合成培养基，常用“[-]”表示。这种培养基往往缺少某些生长因子，所以经过诱变过的营养缺陷型菌株不能生长。2.完全培养基，基础培养基添加血清等物质后，叫完全培养基，也叫（血清）细胞培养基。完全培养基可用来满足微生物的各种营养缺陷型菌株的生长需要，常以“[+]”表示。3.补充培养基，凡是只能满足相应的营养缺陷型生长需要的组合培养基，称为补充培养基，它是在基本培养基中加入该菌株不能合成的营养因子而组成的。根据在基本培养基中加入的是A或B等营养因子代谢物而分别用[A]或[B]等来表示。李氏琼脂 Herrold’s 卵黄琼脂基础 指示选指示选择性培养基基础 肝浸液肉汤 肝浸液琼脂 胰膘肉汤 胰膘琼脂。

鉴别培养基(differential media) 在培养基中加入某一反应底物和指示剂，以区别某些微生物的特性从而鉴别之。又分一般鉴别培养基和选择性鉴别培养基。只用于区别不同微生物种类的培养基称为-般鉴别培养基，此类培养基中一般不加抑菌剂而只含指示剂，如克氏双糖铁培养基，含有葡萄糖及乳糖，以酚红作为指示剂，观察培养基底层与斜面的颜色变化判定细菌对葡萄糖和乳糖的发酵能力，加人柠檬酸铁铵，培养后观察是否产生黑色沉着以判定细菌是否分解蛋白胨中的含硫氨基酸而产生硫化氢；又如伊红-美蓝琼脂，含有乳糖(反应底物)、伊红-美蓝(指示剂)用以鉴别大肠埃希菌、肠道病原菌和其他杂菌。一般鉴别培养基的特点是在配方中都含有指示剂，并可用于区别不同种类的微生物，有些鉴别培养基也可同时作为细菌的特殊需要用来分离培养某些细菌，如胰酪胨大豆琼脂和巧克力色血琼脂。赫奇逊液体培养基 弓形杆菌肉汤 生脂固氮螺菌培养基 生脂固氮螺菌琼脂培养基。选择性改良NPNL培养基添加剂2

ETSA培养基基础 Stainer and Scholte液体培养基 RCVBN培养基 RCVBN琼脂培养基。PYG培养基

半固体培养基(half-solid medium) 在液体培养基中加人0.2%~0.5%的琼脂粉，加热溶解后冷却即成，以倒置不流动的较软状态为宜，一般供细菌动力试验、菌种传代、保存和储运标本之用。固体培养基(solid medium) 培养基中含有足量的凝固剂(琼脂粉>0.5%)，在常温下能保持固体状态。此类培养基大都用于微生物的分离、纯化、药敏试验及菌苗制造。如营养琼脂、营养斜面、SS琼脂、TCBS琼脂等。此外，还有一些特殊用途的培养基，如用血清或鸡蛋做凝固剂配成的吕氏血清斜面培养基、鸡蛋斜面培养基等。PYG培养基

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