甲苯胺蓝DNA琼脂

培养基中谷氨酰胺作用及使用方法？几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求，细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质，在缺少谷氨酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃ 冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基 4℃冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷氨酰胺。GlutaMAX-I是什么？培养细胞如何利用GlutaMAX-I？这个二肽有多稳定？GlutaMAX-I 即谷丙氨酸二肽，是一个L-谷氨酰胺的衍生物，其不稳定的 alpha-氨基用L-丙氨酸来保护。一种肽酶逐渐裂解二肽，释放L-谷氨酰胺供利用。GlutaMAX-I 二肽非常稳定，即使在121磅灭菌20分钟，GlutaMAX-I 二肽溶液有较小的降解，如果在相同条件下，L-谷氨酰胺几乎完全降解。培养基中的各种成分会被微生物不同速率地利用，因此需要在适当的时间点更新培养基以维持细胞的生长状态。甲苯胺蓝DNA琼脂

培养细胞时应使用5%还是10%CO2，或者根本没有影响？一般培养基中大都使用 HCO3-/CO32-/H+ 作为pH的缓冲系统，而培养基中NaHCO3的含量将决定细胞培养时应使用的CO2浓度。当培养基中 NaHCO3含量为每公升3.7g时，细胞培养时应使用10% CO2；当培养基中NaHCO3 为每公升1.5g时，则应使用5%CO2培养细胞。NaHCO3的作用：培养基中使用了 NaHCO3-CO2 缓冲系统，并采用开放培养，使细胞代谢产生的CO2及时溢出培养瓶，再通过稳定调节温箱中CO2浓度（5%） ，与培养基中的NaHCO3处于平衡状态，从而调节培养基的PH值。NEAA：非必须氨基酸，NEAA（非必需氨基酸） 是含几种非必需氨基酸的合剂，添加到的原培养基不同，NEAA 也有不同的种类，比如添加至MEM的NEAA，含L-Alanine、L-Asparagine、L-Aspartic Acid、 L-Glutamic Acid、L-Glycine、L-Proline、L-Serine。碳酸钠溶液如果细菌的生长受到限制，可以尝试调整培养基的成分或添加辅助物质，例如控制培养基中氧气的含量。

培养基的分类有几种呢？上海瑞楚生物科技有限公司小编介绍，按培养基的物理状态区分：1.液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。2.固体培养基，一类配制成的固体状态的基质。根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。3.半固体培养基，指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。4.脱水培养基，又称预制干燥培养基，指含有除水分外的一切成分的商品培养基。

天然培养基是指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、、鸡胚浸出液等。组织培养技术建立早期，体外培养细胞都是利用天然培养基。但是由于天然培养基制作过程复杂、批间差异大，因此逐渐为合成培养基所替代。普遍使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。血清质量高低取决于两方面因素：一是取材对象，二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内，取材过程应严格按照操作规程执行，制备出的血清要经过严格的质量鉴定。特定的培养基可用于特定的微生物和组织细胞培养。

培养基的种类有哪些？鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及其代谢产物的不同，在培养基中加入特定的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。例如糖发酵管、克氏双糖铁琼脂（KIA）、伊红-亚甲蓝琼脂和动力-吲哚-尿素（MIU）培养基等。选择培养基：在培养基中加入抑制剂，去抑制标本中的杂菌生长，有助于所选择的细菌种类的生长。例如培养肠道致病菌的SS琼脂，其中的胆盐能抑制革兰阳性菌，枸橼酸钠和煌绿能抑制大肠埃希菌，因而使致病的沙门菌、志贺菌容易分离到。培养基是一种营养物质混合物，可以为细胞提供生长所需的物质。1M磷酸盐缓冲液（pH6.0）

为了避免细胞爆破释放DNA和蛋白质，培养基中常常添加DNA酶和蛋白酶等酶类。甲苯胺蓝DNA琼脂

在培养基中加人某种抑制剂和指示剂，抑制某些细菌生长，促进目的菌的繁殖，并使所生长的细菌菌落具有一定特征，以助鉴别挑选，这类培养基称为选择性鉴别培养基。如SS琼脂，在该培养基配方中含有乳糖(反应底物)、中性红和柠檬酸铁铵(指示剂)、灿烂绿及胆盐等(抑菌剂)。灿烂绿和胆盐等抑菌剂能抑制革兰氏阳性菌及部分大肠埃希菌的生长，而对沙门菌及志贺菌基本无影响，而且大肠埃希菌能发酵乳糖产酸，使菌落变红色，沙门菌和志贺菌不发酵乳糖，其菌落为无色。如细菌产生硫化氢，则与柠檬酸铁铵反应生成硫化亚铁沉淀，菌落中心呈黑色或褐色。以此达到鉴别的目的。甲苯胺蓝DNA琼脂

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