LAMVAB琼脂基础
细菌培养基之牛肉膏琼脂培养基:牛肉膏0.3g ,蛋白胨1.0g,氯化钠0.5g,琼脂1.5g,水100ml在烧杯内加水100ml,放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠,用蜡笔在烧杯外作上记号后,放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后,加入琼脂,不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水,用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2-7.6,分装在各个试管里,加棉花塞,用高压蒸汽灭菌:1.05千克每平方厘米、121摄氏度维持15-30分钟。牛心培养基:取新鲜牛心(除去脂肪和血管)250克,用刀细细剁成肉末后,加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号,煮沸,转用文火炖2小时。过滤,滤出的肉末干燥处理,滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心,灭菌,备用。制备培养基需要考虑生长细胞所需的营养、酸碱度和水分含量等因素。LAMVAB琼脂基础
培养基
细菌培养基之根瘤菌培养基:葡萄糖10g,磷酸氢二钾0.5g,碳酸钙3g,硫酸镁0.2g,酵母粉0.4琼脂20g,水1000ml,1%结晶紫溶液1ml。先把琼脂加水煮沸溶解,然后分别加入其他组分,搅拌使溶解后,分装,灭菌,备用。放线菌培养基:(1)淀粉硝酸盐培养基(高氏一号培养基)可溶性淀粉2.0g,硝酸钾0.1g,磷酸氢二钾0.05g,氯化钠0.05g,硫酸镁0.05g,硫酸亚铁0.001g,琼脂2g,水100ml。先把淀粉放在烧杯里,用5ml水调成糊状后,倒入95ml水,搅匀后加入其他药品,使它溶解。在烧杯外做好记号,加热到煮沸时加入琼脂,不停搅拌,待琼脂完全溶解后,补足失水。调整pH值到7.2-7.4,分装后灭菌,备用。NWRI琼脂常用的培养基中添加的基本营养物质包括碳源、氮源、磷酸盐、有机物、无机盐和微量元素。
培养基在医学上也有着普遍的应用。病原微生物的病理生理学研究和临床医疗常常需要使用培养基。例如,在病原体研究中,医学实验室常常要利用各种培养基技术来分离和鉴定病原体、判断病原体对药物的敏感性和抗药性、以及预测疾病的发展和蔓延趋势等。培养基还在食品、环境、制药等领域中得到普遍应用。食品中常常需要检测生菌和检验产品的污染,环境中也需要快速监测和诊断各种细菌和病毒等微生物因素。制药行业则需要选择较适合的培养基,以提高某种微生物的产量和制备质量等。
合成培养基(synthetic medium) 由已知化学成分的营养物质组成的培养基。根据微生物对营养要求的不同,可完全由无机盐或化合物组成,如:氨基酸、糖、嘌呤、嘧啶、维生素等,其组成成分已知,只要严格操作,各批次间质量可做到稳定一致。此培养基可用来检测某种营养物或药物对微生物代谢的影响。组织细胞培养液均属合成培养基。合成培养基的成本较高,其价格相当于同类天然培养基的几倍以至于几十倍。只含几种无机盐的合成培养基,只适用于自养菌的培养,如培养亚硝化细菌、氧化硫杆菌等的培养基。有些培养基大部分成分为已知化学结构的营养物质,其中的个别或少数成分为未明化学成分的必须营养物,成为半合成培养基,如百日咳菌苗生产用的水解酪素培养基。含血清培养基是一种以动物血清为主的培养基普遍用于诱导细胞分化和胚胎发育研究等方面。
生长基(也称为普遍培养基,Nutrient Agar)是较常用的预装培养基之一,由肉汤、酵母提取物和琼脂组成,其中肉汤作为氮源,酵母提取物是有机碳源,琼脂则提供了基础结构。这种培养基适用于大多数微生物的生长,可用于分离和纯化菌落。微生物筛选基涵盖了不同类型的预装培养基,例如:MacConkey Agar、Eosin Methylene Blue Agar(EMB)、Sabouraud Agar等等。这些培养基是为了筛选或区别不同类型的微生物而设计的,比如MacConkey Agar用于筛选革兰氏阴性杆菌,EMB用于筛选带有发酵代谢特征的细菌,而Sabouraud Agar则是用于细菌的培养。特定微生物培养基是为了培养和分离特定微生物而设计的,比如:Thayer Martin Agar是专门用于淋球菌的培养基,Lowenstein Jensen Agar是用于结核分枝杆菌的培养基。因为这些特定微生物通常较为难培养,所以特定的培养基在选择上尤为重要。液体培养基普遍应用于微生物菌株的生长、染色及细胞背景下的细胞培养等方面。LAMVAB琼脂基础
选择培养基时,必须考虑具体微生物的生长条件。LAMVAB琼脂基础
bFGF是一个肝素结合的多肤类丝裂源,普遍分布于各种组织中。bFGF 是一种重要的细胞增殖分化调节剂,可刺激多种细胞的增殖。有研究发现它对滋养细胞也有促增殖作用。bFGF 主要是与细胞膜上FGF受体结合发挥作用,刺激与增殖有关的基因表达。Thomson 等认为,像其他体外培养的人体细胞一样,hES 细胞要求 bFGF 的存在以促进增殖。同理EGF(上皮生长因子) , 是人体内的一种活性物质,由53个氨基组成的活细胞,藉由刺激表皮细胞生长因子受体之酪氨酸磷酸化,达到修补增生肌肤表层细胞,据说对受伤、受损之表皮肌肤拥有很好的疗效,其较大特点是能够促进细胞的增殖分化。所以加入它们都是促进细胞增殖的。LAMVAB琼脂基础
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