营养葡萄糖琼脂培养皿
曙红亚甲蓝琼脂培养基(EosinMethyleneBlueAgar,简称EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于分离和鉴定肠道致病菌,尤其是大肠杆菌。以下是EMB培养基的特点和相关信息:1.**成分**:EMB培养基通常包含蛋白胨、牛肉浸粉、氯化钠、乳糖、亚甲蓝、曙红钠和琼脂。其中,蛋白胨和牛肉浸粉提供细菌生长所需的氮源和其他营养元素;乳糖作为可发酵的碳源;氯化钠维持渗透压;曙红钠和亚甲基蓝作为抑制剂和指示剂,能够在酸性条件下结合形成黑色沉淀;琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值一般调节至7.2±0.2(25℃)。3.**用途**:EMB培养基是一种弱选择性培养基,特别用于分离肠道致病菌,如大肠杆菌。它通过抑制非目标菌的生长,促进目标菌的生长,从而实现分离。4.**实验原理**:曙红钠为酸性染料,亚甲基蓝为碱性染料。细菌分解乳糖产酸时,细菌带正电荷,可以与带负电的酸性染料结合,即染上了曙红钠的颜色;如果细菌因产碱性物质较多,带负电荷时与带正电荷的碱性染料亚甲基蓝结合而使得菌落呈蓝色。细菌产酸量较大时,染料可析出结晶形成金属光泽。EMB培养基的两种染料是:1.艾奥辛(Eosin);2.亚甲蓝(Methylene Blue)。营养葡萄糖琼脂培养皿
LB琼脂(Miller)是一种用于实验室的微生物培养基,特别适合于大肠杆菌(E.coli)的培养。这种培养基的配方包括蛋白胨、酵母提取物和氯化钠,以及作为凝固剂的琼脂。Miller配方的特点是含有较高的氯化钠浓度,这有助于选择性地培养某些细菌。**成分**:-蛋白胨(Tryptone):10.0g-酵母提取物(YeastExtract):5.0g-氯化钠(NaCl):10.0g-琼脂(Agar):15.0g**制备方法**:1.将40克LB琼脂粉末加入到1升蒸馏水中。2.加热至沸腾,同时搅拌以确保粉末完全溶解。3.在121°C下高压灭菌15分钟。4.灭菌后,冷却至50°C,然后分装到无菌培养皿中。**应用**:-适用于非选择性培养大肠杆菌菌株,用于克隆、质粒DNA制备和重组蛋白生产。-当加入适当的抗生物质时,也适合选择性培养。**特点**:-无需复杂配置,快速溶解,方便使用。-经济实惠,适合大量培养基的制备。**储存条件**:-通常建议在常温(10-30℃)下储存。LB琼脂(Miller)因其营养丰富、制备简单的应用,成为分子生物学和微生物学实验室中的标准培养基之一。在实际使用时,应严格按照产品说明书或相关标准进行操作,以确保培养效果。麦康凯琼脂(MacC)预装培养皿在科研领域,BHI Agar用于各种微生物的培养,以研究其生物学特性、代谢途径和疾病机制。
四硫磺酸钠亮绿培养基(TTB)基础是一种用于微生物学检验的选择性培养基,特别适用于沙门氏菌的选择性增菌培养。它遵循中国药典(ChP)标准。**成分**:该培养基的主要成分包括蛋白胨、牛胆盐、碳酸钙和硫代硫酸钠。其中,蛋白胨提供碳源、氮源和维生素以满足细菌生长的需求;碳酸钙能中和细菌产酸及吸收有毒的代谢产物;硫代硫酸钠和四硫磺酸钠结合可抑制肠道共生菌,而具有四硫磺酸钠还原酶的细菌能在此培养基中繁殖;牛胆盐和煌绿可抑制大肠群菌和其他革兰氏阳性细菌。**pH值**:培养基的pH值通常调节至8.4±0.2(25℃)。**检验原理**:蛋白胨提供细菌生长所需的营养;碳酸钙中和细菌代谢产生的酸;硫代硫酸钠在培养基中与碘和碘化钾反应形成四硫磺酸钠,抑制非目标菌;牛胆盐和煌绿抑制革兰氏阳性菌。**用法**:称取培养基46.0g,加热溶解于1000ml纯化水中,121℃高压灭菌15分钟。临用前,每1000ml培养基中加入碘试液20ml和亮绿试液10ml,混匀后分装备用。**添加剂**:每瓶培养基需配套添加碘液和0.1%煌绿水溶液。碘试液由碘6g与碘化钾5g加水20ml溶解制成。亮绿试液由亮绿0.1g加水100ml溶解制成。
亚碲酸钾卵黄增菌液(PotassiumTelluritesolution)是一种用于微生物培养的增菌液,特别适用于金黄色葡萄球菌的分离和鉴定。以下是其特点介绍:1.**成分**:含有30%卵黄悬浮液和0.16%亚碲酸钾,这些成分有助于金黄色葡萄球菌的生长,同时抑制其他微生物。2.**选择性**:亚碲酸钾具有抑制某些细菌生长的作用,特别是对革兰氏阴性细菌和一些革兰氏阳性细菌有较强的抑制效果,而金黄色葡萄球菌能够抵抗这种抑制作用。3.**使用方法**:通常与Baird-Parker琼脂基础培养基配合使用,将增菌液添加到已冷却至45-50℃的Baird-Parker琼脂基础培养基中,混合均匀后倾注平板。4.**培养效果**:含有卵磷脂酶的金黄色葡萄球菌在这种培养基上能够降解卵黄,产生透明圈,而脂酶作用则产生不透明的沉淀环。凝固酶阳性的金黄色葡萄球菌还能还原亚碲酸钾,产生黑色菌落。5.**储存条件**:建议在2-8℃的条件下保存,以保持其有效性。6.**有效期**:在适当的储存条件下,亚碲酸钾卵黄增菌液的有效期通常为半年至一年。7.**注意事项**:由于亚碲酸钾卵黄增菌液的特殊性质,不能使用常规方法进行灭菌。使用前应在完全培养基上进行无菌实验,以确保培养基的无菌性。改良Letheen琼脂培养基的配方根据具体的应用需求可能会有所不同。
伊红美蓝琼脂(EMB)是一种常用的微生物学培养基,主要用于大肠杆菌和其他肠杆菌科细菌的分离和鉴别。以下是伊红美蓝琼脂的特点介绍:1.**成分**:伊红美蓝琼脂的主要成分包括蛋白胨、乳糖、磷酸氢二钾、琼脂、伊红Y溶液和美蓝溶液。蛋白胨提供氮源和碳源,乳糖作为可发酵的糖类,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,而伊红和美蓝则作为pH指示剂。2.**pH值**:伊红美蓝琼脂的pH值为7.1,适合多数肠道细菌的生长。3.**制法**:首先将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH值后进行高压灭菌。使用前加入乳糖并加热溶化琼脂,冷却至50-55℃时加入伊红和美蓝溶液,摇匀后倾注平板。4.**用途**:主要用于大肠杆菌和产气肠杆菌的分离和鉴别。大肠杆菌在该培养基上分解乳糖产酸,菌落呈深紫色并带有金属光泽;而产气肠杆菌则可能呈现棕色,很少有金属光泽。5.**保存**:伊红美蓝琼脂应在4℃至8℃的条件下保存,避免冻结,以保持其有效性。6.**有效期**:在适当的贮存条件下,伊红美蓝琼脂的有效期通常为三个月。
通过进一步的生化测试,如氧化/发酵葡萄糖测试、花青素鉴定等,来进一步确认分离的菌株是否为目标肠道菌。营养葡萄糖琼脂培养皿
强化梭菌培养基(ReinforcedClostridiumMedium,RCM)是一种专门用于培养梭菌属(Clostridium)细菌的培养基,具有以下特点:1.**营养成分**:RCM培养基包含蛋白胨、牛肉浸粉、酵母粉、葡萄糖、可溶性淀粉、氯化钠、醋酸钠和L-半胱氨酸盐酸盐等,这些成分为梭菌提供碳源、氮源、维生素和生长因子。2.**pH值**:培养基的pH值一般控制在6.8±0.1(25℃),为梭菌提供适宜的生长环境。3.**用途**:主要用于梭菌的增菌培养和计数,特别适用于厌氧条件下梭菌的培养。4.**抑制作用**:醋酸钠成分有助于抑制革兰氏阴性菌和一些非目标细菌的生长,使得RCM培养基更适合梭菌属细菌的选择性培养。5.**稳定性**:微量琼脂(0.5g/L)的添加增加了培养基还原环境的稳定性,有助于厌氧环境的形成,防止二氧化碳、氧气和还原产物的扩散。6.**生长表现**:无动力的细菌在RCM培养基中通常呈颗粒状或条状生长,便于计数;而有动力的细菌则可能呈现浑浊生长,一般不适合计数。7.**制备方法**:将RCM培养基粉末溶解于蒸馏水中,加热至完全溶解后分装,进行高压灭菌以备使用。8.**质控结果**:RCM培养基适用于生孢梭菌和产气荚膜梭菌等梭菌的生长,这些菌株在培养基中的生长情况良好。营养葡萄糖琼脂培养皿
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