河北DNA未知病原鉴定原理
病毒鉴定常用方法有哪些?病原学检测主要适用于急性期血液标本,一般认为发病7天内检测阳性率高。(1)核酸检测:采用荧光定量RT-PCR方法,是目前早期诊断寨卡病毒病的主要检测手段。(2)病毒分离:将标本接种于蚊源细胞(C6/36)或哺乳动物细胞(BHK21、Vero)进行分离培养,出现病变以后,用检测核酸的方法鉴定病毒。也可使用乳鼠脑内接种进行病毒分离。血清学检测:(1)血清特异性IgM抗体:发病3天后可检出病毒特异IgM抗体,但发病7天后检出率高。可采用ELISA、免疫荧光等方法检测。IgM抗体阳性,提示患者可能新近寨卡病毒,但寨卡病毒IgM抗体与登革病毒、黄热病毒和西尼罗病毒等黄病毒有较强的交叉反应,易于产生假阳性。(2)中和抗体:采用空斑减少中和试验方法检测。患者恢复期血清中和抗体阳转或滴度较急性期呈4倍及以上升高,且排除登革、乙脑等其他常见黄病毒,可以确诊。随着医学微生物学研究技术的不断发展,病原学诊断已不再局限于病原体水平。河北DNA未知病原鉴定原理
微生物鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础,而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。大多微生物鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化,色原性或荧光原性底物的酶解,测定挥发或不挥发酸,或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。药敏试验分析系统的基本原理是将微量稀释在条孔或条板中,加入菌悬液孵育后放入仪器或在仪器中直接孵育,通过测定细菌生长的浊度,或测定培养基中荧光指示剂的强度或荧光原性物质的水解,观察细菌的生长情况。在含有培养基中,浊度的增加。河北DNA未知病原鉴定原理为了食品的安全,人们的健康,微生物检测极其必要。
有些微生物是有益的,也有些微生物的存在可引起多种应变性疾病和传染性疾病,会对人身体健康产生不良的影响;还会使食品及原料腐烂和变质。所以,微生物检测必须严格把关。微生物检测的必要性:1、食品:食品因含有微生物可依赖生长的营养成分,因此食品会受到微生物不同程度的污染。食品质量安全关系到人民**的身体健康,生命安全及社会经济。为了食品的安全,人们的健康,微生物检测极其必要。2、医院:医院都和微生物有着极为密切的关系。加强医院的微生物检验与监测,对于预防和控制医院起着十分重要的作用。3、空气:室内空气是微生物污染的重要传播途径。室内舒适的温度,湿度等环境条件以及相对密闭的室内更为各种有害微生物滋生创造了条件。只有有效地检测微生物的含量,才能采取有效地措施,才能保证人体健康不受微生物的危害。
传统的血清学与分子生物学方法如ELISA与PCR,由于病原微生物的特异性差异,有时只能用于病原微生物特定种甚至特定种特定株系分离物的检测;而电镜与生物学接种鉴定方法又难以将病原微生物鉴定至物种水平。相比之下,高通量测序技术可以提供一条新的病原微生物鉴定途径。病原微生物检测的不可知性使得高通量测序成为研究这类病原微生物的有用工具。目前,该技术在人类与动植物病原微生物的鉴定中已经有较多的应用。高通量测序在临床virology领域的应用病毒作为一种古老的物种存在于自然界,几乎能够在任何物种寄生,与人类健康息息相关。虽然大部分病毒没有出现明显的临床症状,少数病毒能够引起人类多种疾病,表现出包括发热、腹泻,出血、出疹、呼吸道症状、神经系统症状等。传统的微生物鉴定方法依赖于表型鉴定。
微生物鉴定还可以用微生物对噬菌体的敏感性作为指标来鉴定微生物的种属。因为各种噬菌体都有其严格的宿主范围,不同的细菌作为噬菌体的宿主对应有特定的已知特性的噬菌体,其和噬菌体的作用方式也有接合,转化,转接,溶原性转换和原生质体融合等多种方式。部分细菌可以采用血清学反应的方法来进行区分和鉴别,就比如说常见的疑似伤寒沙门菌的菌种鉴别,我们可以利用血清学反应,现有的已知的对应的血清学反应抗体,蘸取菌种液在抗体液中涂抹,看是否会出现血凝现象(即是否出现淡白色的凝集颗粒)。随着医学微生物学研究技术的不断发展,病原学诊断已不再局限于病原体水平,深入到分子水平。河北DNA未知病原鉴定原理
微生物鉴定可以用微生物对噬菌体的敏感性作为指标来鉴定微生物的种属。河北DNA未知病原鉴定原理
病原微生物检测方法-多种PCR结合使用,基因芯片技术与多重PCR结合可以通过PCR对目的基因进行放大,通过基因芯片的荧光探针增加检测的灵敏性和特异性,使得两种检测技术的优势互补,已应用于病原微生物的检测。将病原体特异性基因作为靶基因设计出引物与探针,进行多重PCR扩增,制备出寡核苷酸芯片,再对待测样本靶基因进行多重PCR扩增,将扩增产物与病原菌多重PCR基因芯片检测体系杂交,可根据杂交信号直观地判读样品中所含病原体的种类、型别、毒力、侵袭力,从而对病原体进行检测和鉴定。河北DNA未知病原鉴定原理
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