山西咽喉植绒拭子

    使用研磨仪、研磨棒或者使用超声破碎细胞的方法破碎细胞，加入去污剂，如sds等，除去膜脂。去除细胞内的蛋白质，包括与DNA结合的组蛋白，通过加入蛋白酶，醋酸盐沉淀，或者酚／氯仿抽提等方法去除。加入RNA酶去除RNA，如实验不严密，可省略此步。沉淀DNA，需在冷乙醇或异丙醇中沉淀，放在冰箱-20℃沉淀30分钟以上，原理是DNA在醇中不可溶而黏在一起发生沉淀。总结:DNA提取方法有下面⑦种一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎细胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小为100-150kb二.甲酰胺解聚法：破碎细胞同上，然后用高浓度甲酰胺解聚蛋白质与DNA的结合，再透析获得DNA可得DNA200kb左右。三.玻璃棒缠绕法：用盐酸胍裂解细胞，将裂解物铺于乙醇上，然后用带钩或U型玻璃棒在界面轻搅，DNA沉淀液绕于玻棒。生成DNA约80kb。四.异丙醇沉淀法：基本同1法，*用二倍容积异丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在异丙醇中可溶状态）五.表面活性剂快速制备法：用TritonX-100A或NP40表面活性剂破碎细胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。六.加热法快速制备：加热96℃-100℃，五分钟，然后离心后取上清，可用于PCR反应。七.碱变性快速制备：先用NaOH作用20分钟，再加HCI中和。植绒拭子可以让细胞样本均集中在刷形纤维的近表面，因此**终可释放出约90%的已吸收样本。山西咽喉植绒拭子

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