南京艾菱菲生物脑梗MCAO模型模型检测

时间:2024年06月18日 来源:

缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元(NVU)一系列的缺血级联反应(包括兴奋性氨基酸毒性,氧(氮)化应激和缺血后炎症等),从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡,*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元,神经胶质细胞,血管细胞(内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞)以及基底膜共同构成,这些细胞相互作用,共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流,维持和修复髓鞘,清*代谢产物,从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时,NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤,诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶,而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍,但尚未死亡,及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。将实验外包可以节省了大量时间,构建脑梗MCAO模型,来艾菱菲生物定制模型。南京艾菱菲生物脑梗MCAO模型模型检测

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局灶性缺血模型/线栓法引起的大脑中动脉栓塞(Middle Cerebral Artery Occlusion,MCAO)由于大(小)鼠脑血管解剖结构与人类相似,大脑中动脉也是临床缺血性卒中的高发部位,同时,采用线栓法也便于观察缺血和再灌注、永jiu(持续)和短暂性损伤等多种状态,在评价药物量效关系和确认治*时间窗等方面有一定优势,因此,MCAO是目前*广为接受一种药效模型。神经元尼氏体与细胞核呈蓝紫色,背景呈浅蓝色。结果显示:假手术组海马 CA1 区神经元排列规整,神经元胞体及树突内尼氏体丰富;实验组神经元排列紊乱,并伴有细胞水肿和坏死发生,尼氏体染色较浅,模糊不清;阳性*组神经元尼氏体排列较为规整,偶见神经细胞水肿,和溶解。本地脑梗MCAO模型行为学检测脑缺血是指由脑内血流量突然减少或代谢速率速增所致脑血流无法满足正常代谢需求的病理状态,可导致脑损伤。

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SD大鼠MCAO模型作为世界上*通用的模型之一,在其制作时为了达成较高的成功率也需要不断的探索和努力,我们再次总结了难点和问题点,希望这篇文章可以为大家制备模型提供参考。 (1)麻醉时间,麻醉程度适中,过浅影响操作,过深导致死亡。 (2)血管分离,在分离右侧CCA、ECA、ICA时,要注意迷走神经的保护, 减少对迷走神经的损伤, 尽量避免对迷走神经的直接牵拉。 (3)术中状态监护,例如发现呼吸异常,用镊子将大鼠舌头牵拉至嘴角一侧,防止舌头根部堵塞呼吸道出现窒息情况。 (4)手术视野,可以制备金属勾,用橡皮筋缠绕连结金属钩固定在固定板上,从而使手术切口左右上下拉开,扩大手术视野。

采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价,0分:无神经功能缺损症状;1分:出现左侧 Honer征,轻度神经功能缺损;2分:提尾对侧前肢内旋,肩内收,中度神经功能缺损;3分:向对侧转圈、向对侧倾倒,重度神经功能缺损;4分:不能自发行走,部分意识丧失。鼠侧倾倒,评分为3分。 沿脑桥上界面切断,去除嗅球,称全脑重,立即放入-20℃冰箱, 20 min 后取出,由前向后做连续冠状切片(切片厚度2 mm)。将脑切片置入0.1% TTC溶液中,后放入恒温振荡器中,37℃避光染色30 min,将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h,取出脑片,相机拍照,用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。注意缝合时不要将线栓带出,*后根据评分来判断成模性。

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1、大脑中动脉阻塞(MCAO)模型-啮齿类 诱导方式:线栓法堵塞大脑中动脉动物种属:大鼠模型特征:模型可高度再现的MCA梗死、具有明确的缺血半暗带(有梗死风险但潜在可恢复的低灌注组织)、可再现的感觉运动和认知缺陷、可用于评估神经保护药物、不适合溶栓药物研究、动物会有死亡,尤其是缺血时间越长时、分缺血再灌注模型和永jiu缺血模型 缺血再灌注模型与永jiu梗死模型差别:缺血再灌注模型包括原发性脑组织损伤和缺氧再灌注后由能量代谢紊乱引起的继发性损伤,两种损伤之间存在时间差;永jiu梗死模型无此特征、永jiu梗死模型梗死核*区相比缺血再灌注模型更大,缺血半暗带可能更小、永jiu梗死模型动物死亡率相对更高实验外包团队具有丰富的实验操作经验。他们经多年的实践积累,对实验操作过程中的环节有着深入的了解掌握。南京艾菱菲生物脑梗MCAO模型模型检测

在实验中,研究人员会观察动物的行为表现,例如运动协调能力、平衡能力等,以评估神经功能缺损的程度。南京艾菱菲生物脑梗MCAO模型模型检测

迄今为止,缺血性脑卒中模型覆盖各种小型动物(小鼠,大鼠等)和较大型动物(兔、犬、猪、猴等),并应用于卒中治*药物的临床前药理药效研究。然而,自1970年代以来,大量在动物模型上得到验证的受试药物均未能在人体临床试验中获得理想的治*效果,可能原因包括:1)以往相对简单的动物模型不能准确模拟人类卒中的病理生理过程;2)临床前动物实验的药效评价方法尚难以成功转化到复杂的人体临床试验标准。2009年国际公认的“脑卒中治*学术工业圆桌会议”(Stroke Therapy Academic industry Roundtable,STAIR)发布了临床前缺血性脑卒中药物研发准则,提出提高临床前药理药效研究质量的具体要求。近年来随着更深入的基础研究发现,更多符合人类发病机理和病理生理过程的缺血性脑卒中动物模型已被开发。南京艾菱菲生物脑梗MCAO模型模型检测

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