芜湖石家庄RNA提取试剂

RNA提取：预备工作（1）塑料制品：尽量使用一次性无菌塑料制品。已标明RNase-free的塑料制品，如没有开封使用过，通常不必再处理。处理的步骤如下：O在玻璃烧杯中注入去离子水，加入DEPC使其终浓度为0.05%~0.1%（DEPC-H2O）。（DEPC二乙基焦碳酸酯为活性很强的剧毒物，须在通风橱中小心使用）O将待处理的塑料制品放入一个可以高温灭菌的容器中，注入DEPC-H2O，使塑料制品的所有部分都浸泡到溶液中，在通风柜中37℃或室温下处理过夜。O将DEPC-H2O小心倒入废液瓶中，将装有DEPC-H2O处理过的塑料制品的容器以铝箔封口，高温高压蒸汽灭菌至少30分钟。O灭菌塑料制品烘烤干燥，置洁净处备用。（2）玻璃和金属物品250℃烘烤3小时以上。总RNA提取试剂试剂能促进不同种属不同分子量大小的多种RNA的析出。芜湖石家庄RNA提取试剂

RNA提取试剂的选择：选择合适的提取试剂是较重要的一步。好的提取试剂在确保成功的同时，操作方便且经济实用。对于动物组织、简单的植物材料、各种微生物、培养细胞的totalRNA提取，Takara公司的RNAisoPlus具有诸多的成功案例。随着2013年7月柱型提取试剂TaKaRaMiniBESTUniversalTotalRNAExtractionKit的成功上市，进一步丰富了TakaraRNA提取的产品线。该产品采用了独特的细胞裂解系统，无需苯酚氯仿抽提等步骤，简单快捷。组织或细胞裂解后，提取操作光需20分钟便可完成金华深圳RNA提取试剂RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间，但这并不表示RNA不纯，需电泳检测。

拭子RNA提取试剂的选择？应有较高的提取得率。对离心柱法而言，拭子核酸得率的高低，主要取决于离心柱对核酸的吸附能力、洗脱能力以及裂解液的裂解消化能力。离心柱的硅胶膜RNA吸附性能好、裂解液细胞裂解能力强、洗脱液洗脱能力好，核酸的提取得率就高。反之，如果离心柱硅胶膜吸附能力不好，裂解液和洗脱液没有经过很好的优化，RNA的提取得率就不高。至于RNA提取得率的确定，我们可以使用紫外分光光度法，但是不能作为判断得率的单独标准，较好还是要做个PCR或荧光定量。

植物RNA提取过程：植物组织成分相对于动物组织来说复杂多样，因此其RNA的分离和纯化的难度也随之加大，如果要完美的数据结果，那么提取纯度高、完整性好的RNA就成了关键所在。植物RNA的提取一般会经历以下几个过程：1.破碎细胞壁。2.裂解细胞膜。3.杂质去除，包括：DNA、蛋白质、多糖、多酚、次生代谢产物等。4.纯化和浓缩RNA。而在RNA提取过程中，纯化除杂的过程是影响RNA纯度的关键所在。在完整的细胞内，多糖多酚类化合物，次级代谢产物，蛋白质如RNase等与核酸是分离的，一旦细胞破碎，这些物质就不可避免的会与RNA发生相互作用。在提取时，实验人员需要佩戴口罩和手套等各种防护装备，以防实验室污染。

细胞外RNA（exRNA）已成为研究界的新宠。近年来，人们在血浆或血清样本中成功检测到疾病相关的exRNA，使其有望成为非侵入性的生物标志物。然而，从血浆或血清中分离exRNA仍颇具挑战性，这一方面是因为exRNA丰度低，另一方面是因为血液中的污染物会压制PCR。商品化的试剂盒能简化和加速exRNA提取过程，已成为循环exRNA研究不可缺少的工具。然而，这些试剂盒的提取效率如何，是否能去除血浆中的污染物，是否会偏向特定的RNA，都没有经过评估，而这类评估对于结果解释和实验之间的比较都很关键。RNase主要来自样品的细胞。徐州成都RNA提取试剂

提取的RNA样品中不应存在对酶存在压制作用的有机溶剂及过高浓度的金属离子。芜湖石家庄RNA提取试剂

动物组织总RNA提取：1、尽量选取新鲜的组织，如果不是新鲜的（较好在三个月之内-80℃冰箱或者在液氮中冻存的。在剪取组织时，不要拿到室温直接剪取，一定要放到冰盒上，尽量避免反复冻融。2、用干净的剪刀镊子剪取一小块组织，剪取样本时尽量剪组织中心的部位，或者先将大块的组织先从中间切开，然后再在新鲜切口的位置剪取样本。取下的组织要充分的剪碎，将剪碎的组织放到无RNA酶的EP管中，加入裂解液，剪碎的组织要充分接触裂解液，准备匀浆。3、正常组织选取绿豆粒大小（30~60mg）的组织进行匀浆，如果组织中含有大量的蛋白、脂肪或者是紧密的纤维组织比如肝脏等，适当增减剪取组织的量（可选10~20mg）。4、如果提取的是鱼肌肉，虾肉，海蜇等含水分较多的组织时则应当适当提高样本量用量（推荐100~200mg）。5、条件允许的情况下，动物组织使用高通道组织匀浆机匀浆后即可直接进行提取步骤，如没有该设备。6、较后提取后得到的RNA一定要立即放到冰盒上，以减少RNA的降解。芜湖石家庄RNA提取试剂