宁波昆明RNA提取试剂

酵母总RNA快速提取试剂盒(离心柱型)：一、原理简介。改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤,去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。二、试剂盒特点：1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的RL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。4、多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高。5、有效的去除了无用的5S在总RNA中含量，提高了纯度。买点无酶的吸头、离心管，找一个普通的试验台，穿好实验服戴好手套，保护好自己就好。宁波昆明RNA提取试剂

细胞RNA提取的方法：实验提取步骤：标准Trizol提取步骤为液氮研磨--加入Trizol裂解--加入氯仿抽提--离心--加入氯丙醇沉淀--离心--酒精洗涤--离心。将细胞培养皿置于冰上，加入Trizol裂解5-10分钟，用泵头轻轻吹打后吸取液体放入进口EP管中。加入1/5体积的氯仿，上下混匀液体，4度静置10-15分钟。（氯仿为有机溶剂，有效的使有机相和无机相迅速分离。有机相中主要是酚和蛋白结合，从而使得蛋白和RNA脱离，RNA进入水相）。4度离心15分钟，一定注意选择低温离心。离心后分成三层，RNA在上清里，从离心机轻轻拿出EP管，以免管内物质震荡导致下层沉淀激起。吸取上清的时候一定要动作轻柔，切忌吸取太多，一般吸到400-500ul，避免吸到下层沉淀，将液体置于新的EP管中。加入等体积异丙醇，4度静置10min，然后12000rpm离心10min。苏州正规RNA提取试剂供应商目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。

DNA和RNA的鉴别染色：利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定，非固定细胞核酸，或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果，但该方法已被许多实验室普遍采用。RNA是核糖核酸，DNA是脱氧核酸。区别：溶解性：都溶于水而不溶于乙醇，因此，常用乙醇来沉淀溶液中的DNA和RNA。DNA溶于苯酚而RNA不溶，故可用苯酚来沉淀RNA。

法尔和梅洛的发现。科学家在矮牵牛花实验中所观察到的奇怪现象，其实是因为生物体内某种特定基因“沉默”了。导致基因“沉默”的机制就是RNA干扰机制。此前，RNA分子只是被当作从DNA（脱氧核糖核酸）到蛋白质的“中间人”、将遗传信息从“蓝图”传到“工人”手中的“信使”。但法尔和梅洛的研究让人们认识到，RNA作用不可小视，它可以使特定基因开启、关闭、更活跃或更不活跃，从而影响生物的体型和发育等。诺贝尔奖评审会在评价法尔和梅洛的研究成果时说：“他们的发现能解释许多令人困惑、相互矛盾的实验观察结果，并揭示了控制遗传信息流动的自然机制。这开启了一个新的研究领域。”细胞质和细胞核RNA提取试剂盒特点：细胞质RNA不含DNA，直接用于RT-PCR/qRT-PCR。

石蜡包埋组织RNA快速提取试剂盒（离心柱型）：原理简介：改进的异硫氰酸胍/酚一步法裂解细胞和灭活RNA酶，然后总RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜，再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤，漂洗液将细胞代谢物、蛋白等杂质去除，较后低盐的RNasefreewater将纯净RNA（RNA）从硅基质膜上洗脱。试剂盒特点：1、离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口世界有名公司特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。2、结合了异硫氰酸胍/酚一步法试剂稳定性好，纯度高和离心柱方便快捷的优点，不需要异丙醇沉淀和乙醇洗涤过程，RNA可以直接从离心柱上洗脱避免了过度干燥不易溶解问题。3、独有的MRL裂解液配方，可以有效的消除基因组污染。4、多次漂洗去蛋白过程，提取RNA纯度更高~RNA提取试剂注意事项：硫氰酸胍/苯酚法的一种即用的从细胞和组织中提取总RNA的试剂。宁波昆明RNA提取试剂

RNA提取试剂注意事项：为防止溅入眼睛，请戴防护眼镜或使用透明保护屏。宁波昆明RNA提取试剂

RNA稳定方法：1.在裂解缓冲液中立即溶解，使RNase失活。然后样品可以立即处理或冷冻保存。2.浸泡在稳定试剂中(如DNA/RNAShield)，使核酸酶失活，并在环境温度下长时间保护核酸。这对正在实地收集样本或处理珍贵的病人样本(例如组织活检、全血等)的研究人员特别有帮助。确保样品完全溶解：在RNA提取过程中，较大限度地提高RNA产量和质量的较佳方法是保证样品的完全裂解。然而，并不是所有的样本都对相同的裂解方案敏感。例如，血细胞(如淋巴细胞、PBMCs等)和微生物细胞往往更难以有效地溶解。光光添加基于洗涤剂的裂解缓冲液可能并不总是足够的。为了提高裂解效果，可以将裂解缓冲液与机械裂解步骤(研磨珠破碎)匹配，或者在裂解液上游加入酶裂解步骤(如蛋白酶K、溶菌酶等)。宁波昆明RNA提取试剂