生殖疾病动物模型建模价格

pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠，pirb基因敲入到特异性组织或细胞中。其中pirb-cwt小鼠表达cre，但不含有loxp-pirb等位基因，pirb-chetandpirb-cki小鼠表达cre并分别含有一个或者两个loxp-pirb等位基因。其中f3代杂交小鼠纯合子/杂合子鉴定所用的pcr引物如下：f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp组织特异性的基因敲入也可以通过加入另一对引物，用pcr来验证：pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意：如果dna的样本不够纯，或者pcr的延伸时间不够长，可能扩增不出来1180bp的产物。cre阳性pcr鉴定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安医学院pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。上海东寰疾病动物模型建模。生殖疾病动物模型建模价格

1、动物模型名称：皮肤浅II°及深II°烫伤大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雌雄不限4、实验动物年龄：成年5、实验动物体重：160-200g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：热力致皮肤损伤法。麻醉大鼠，根据体重腹部备皮，然后固定于实验台上。将大鼠移近加热纯净水的烧杯，将纱布条浸入热水中，待水温恒定于99℃时，取出纱布，立即平铺于待烫部位，于纱布接触大鼠皮肤后开始计时。致伤3s为浅II°烫伤，致伤10s为深II°烫伤。2、检测标准：a.皮肤大体观察：致伤3s大鼠局部皮肤发红、轻微水肿。愈合后毛发生长良好，有少量红褐**素沉着，皮肤轻微挛缩，表皮光滑；致伤10s大鼠局部皮肤发白、水肿。愈合后毛发生长良好，皮肤瘢痕形成，表面粗糙不平。生殖疾病动物模型建模价格可以简化实验操作和样品收集。

1、动物模型名称：低铁饲料联合放血致缺铁性贫血大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雌性4、实验动物年龄：初断乳5、实验动物体重：50~70g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：低铁饲料联合放血法诱导。SD大鼠每天给予低铁饲料和超纯水饲养，并每周通过眼底静脉丛放血1mL，连续3周。2、检测标准：血红蛋白含量明显下降，红细胞内游离原卟啉明显升高。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。2.根据要求提供构建成功的模型动物或相关组织材料。

pcrmix：反应条件：pcr扩增产物的电泳鉴定结果如图3所示，从图3中可以看出，6、8、9号为pirb基因敲入小鼠在、，wt小鼠pcr产物没有这两个扩增产物。(c)短链pcr反应，引物如下：primers(℃):forwardprimer(f4):5’-aacaatcaggctgccgaatctg-3’reverseprimer(r4):5’-ctttattagccagaagtcagatgc-3’expectedpcrproduct:targetedallele:344bppirb基因敲入型小鼠能够扩增出344bp的产物，而野生型没有。pcr体系：反应条件：(2)f1代小鼠测序：通过pcr扩增后测序鉴定小鼠基因型，如图4所示，为6号pirb基因敲入小鼠测序峰图，pcr所用引物如下：sequencingprimerforpcrproduct1：5’sequenceprimer(f3):5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’sequencingprimerforpcrproduct2:3’sequenceprimer(r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’(3)southern杂交检测f1代小鼠基因型：采用bamhi和avrii核酸内切酶切割dna分子，切割示意图如图5。具体的southern杂交检测过程如下：步骤a、提取f1代小鼠尾部dna；步骤b、制备探针，通过pcr方法将dig-dutp渗入到步骤a的dna分子中。上海东寰在动物建模方面已经有了多年的技术经验。

1、动物模型名称：D-半乳糖致老年痴呆大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：成年鼠5、实验动物体重：180g-220g6、实验动物环境：SPF级、实验方法：D-半乳糖诱导（大鼠按0.5g/kg体重腹腔注射D-半乳糖溶液）（注：每天1次，连续6-7周。）2、检测标准：①SOD明显下降、MDA明显增加；②水迷宫试验显示学习记忆能力下降；③脑组织神经元数目减少。1.提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。疾病动物模型建模怎么做？生殖疾病动物模型建模价格

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f1代小鼠southern印记的5’探针引物如下：primersfor5’probe:5’probeforwardprimer:5’-aaacgtggagtaggcaatacccagg-3’5’probereverseprimer:5’-aaagaagggtcacctcagtctccct-3’primersfor3’probe:3’probeforwardprimer:5’-ttctgggcaggcttaaaggctaac-3’3’probereverseprimer:5’-aggagcgggagaaatggatatgaag-3’southern印记的目标片段大小如下：5’probe-bamhi:3’probe-avrii:。步骤c、采用限制性内切酶bamhi和avrii对dna进行切割；琼脂糖凝胶电泳分离dna；步骤d、将dna转到尼龙膜上；步骤e、探针变性后，与dna分子进行杂交，nbt/bcip化学显色法显色，拍照观察。southern杂交结果如图6所示，可以看到：6、8、9号pirb基因敲除小鼠如果被bamhi切割，在，wt小鼠只在，如果被avrii切割，pirb基因敲除小鼠在，wt小鼠只在。步骤6、将f1代杂合子小鼠近交获得f2代纯合子pirb基因敲入小鼠，即为本发明所述小鼠pirb基因敲入的动物模型。将本发明获得的动物模型f2代纯合子小鼠与同品系小鼠组织/细胞特异性cre表达的小鼠杂交，获得f3代小鼠，可以实现在不同组织或者细胞类型中敲入pirb基因。对f3代小鼠进行基因型的鉴定：含有无(pirb-cwt)、一个(pirb-chet)或者两个。生殖疾病动物模型建模价格

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