湖南比较好的HE染色外包
HE染色全名为苏木精和伊红染色方法,是**基本的病理学染色技术。由于组织或细胞的不同成分对苏木精的亲和力不同及染色性质不一样。经苏木精染色后,细胞核及钙盐粘液等呈蓝色,可用盐酸酒精分化和弱碱性溶液显蓝,如处理适宜,可使细胞核着清楚的深蓝色,胞浆等其它成分脱色。再利用胞浆染料伊红染胞浆,使胞浆的各种不同成分又呈现出深浅不同的粉红色。故各种组织或细胞成分与病变的一般形态结构特点均可显示出来。质量好的HE具备条件1.细胞核与细胞浆蓝红相映,鲜艳亮丽;2.胞核鲜明、核膜、核染色质颗粒均清晰可见;3.组织或一般结构特点及假物质成分均能显示出来。冰冻切片是否可以做HE染色?湖南比较好的HE染色外包
HE染色构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞内的酸性物质如细胞核的染色质、腺细胞和神经细胞内的粗面内质网及透明软骨基质等均被碱性染料染色,这些物质称为嗜碱性。而细胞质中的其它蛋白质如红细胞中的血红蛋白、嗜酸粒细胞的颗粒及胶原纤维和肌纤维等被酸性染料染色,这些物质称为嗜酸型。如果改变染色液的酸碱度,pH值升高时,则原来被酸性染料染色的物质可变为嗜碱性;pH值降低时,原来被碱性染料染色的物质则可变为嗜酸性。所以说染色液的pH值可以影响染色的反应。重庆值得信赖的HE染色服务脾脏组织HE染色如何观察。
HE染色观察肝脏HE染色切片,首先要在显微镜下找到肝脏的标志性结构——肝小叶。显微镜首先调4倍物镜,调准焦螺旋至视野清晰,可以看到肝小叶结构。人的肝小叶之间结缔组织少,小叶分隔不明显,但动物如猪或小鼠,其肝小叶分界非常明显。肝小叶**有**静脉,在横切片上显示为空洞。肝小叶之间为将物镜调制10倍或20倍,就可以清楚地看到肝小叶结构。肝细胞以**静脉为中心向周围放射状排列,称为肝板。一般在20倍物镜下可以清晰看到肝细胞。20倍物镜下,肝细胞内染色为蓝色的是细胞核,细胞核大而圆,居中,异染色质少而着色浅,能清晰看到核仁。肝细胞胞质丰富,多成嗜酸性,当蛋白质合成旺盛时,胞质内出现散在的嗜碱性物质。肝细胞内有丰富的细胞器比如溶酶体、高尔基体、内质网,等等,但是在光镜下是无法看到的,需要在电镜下才能观察到。当然,肝小叶内除了肝细胞,还有胆小管、肝血窦、肝巨噬细胞等组织形态,但是在HE染色时并不容易观察到。做肝脏HE染色切片主要目的一般都是为了观察肝细胞形态是否完整、胞核有无增大、肝小叶形态是否完整,以检测药物等刺激因素对肝脏的损伤作用。
HE染色原理1、细胞核染色的原理:苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。2、细胞浆染色的原理:伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH在胞浆蛋白质等电点(4.7—5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。HE染色结果如何分析和读片?
HE染色碱染料染主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着色。学上常用的一种染色方法为苏木精 伊红染色法。苏木精 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸颗粒呈强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白液体呈粉红色。HE染色过程中常见的问题以及应对方法。天津比较好的HE染色报告
HE染色技术几种常见的染色问题。湖南比较好的HE染色外包
HE染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。湖南比较好的HE染色外包
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