广州BD单细胞测序分析

时间:2022年06月07日 来源:

RNA测序(RNA-seq)是转录组学研究的重要工具,也是生命科学领域常用的技术之一。相比于传统通路研究低维度、低通量的局限性,转录组学有以下优势:1)能够动态考察细胞基因组的表达,多维度地反映差异变化;2)可用于研究占RNA绝大部分的非编码RNA,研究其结构以及在细胞生命活动中的重要调控作用;3)与蛋白组学研究相互补充,多角度呈现细胞水平的变化信息。作为转录组学研究的技术基础,RNA测序技术也在不断地更新迭代,现如今更大通量、更深精度的测序为众多科研和医学工作者提供了丰富的工具和探索真理的手段。空间转录组可展示组织切片中不同区域的基因表达情况,揭示精细病理区域的信号通路。广州BD单细胞测序分析

空间转录组数据可以用单细胞转录组数据的分析策略进行分析,例如,利用GO和Pathway分析筛选不同发育时期特定空间区域内的信号通路及其关键基因的较大情况,揭示在特定发育时期特定区域内发生的生物学过程。针对任何一个基因,空间转录组可以显示表达该基因的点阵及其空间排布;单细胞转录组可以给出该基因表达的细胞类群;原位测序可以给出该基因在细胞内的表达状况。通过不同发育时间点的信息比较,可以分析细胞类群在某个部位在不同时间点的差异,给出其在细胞内的真实的演变状况。深圳全转录组测序技术支持烈冰生物首批引进 Chromium X 平台,开启百万级通量单细胞测序新时代。

二代测序技术在测序方法上取得了重大突破,基于“边合成边测序”(sequencing by synthesis)和大规模平行测序技术(massive parallel analysis,MPS),使测序通量和读取速度得到极大提升,烈冰生物斥巨资购置的Novaseq6000测序仪的测序原理可以简化为四步:样品文库构建、簇生成、测序和数据分析。由于读长限制,样品DNA或由RNA逆转录得到的cDNA需要被打断成300-500bp的片段,并在3'和5'端接上3种序列:1)Index,用于区分样品来源;2)Adapter,用于结合测序通道上的位点;3)Primer binding site,用于结合PCR引物启动扩增反应。

免疫组库是功能相似的n多细胞的统称。而“免疫”是指免疫细胞,特指T/B淋巴细胞。“So~免疫组库”(Immune Repertoire,IR),指某个体,特定时间点下,所有功能多样性T/B淋巴细胞的总和。T/B细胞利用细胞表面受体(TCR/BCR)识别和结合抗原,介导机体产生针对性的免疫应答,发挥免疫功能并做好记录备案,如果该抗原再次入侵可迅速作出反应,作为健康卫士守护肌体城池。基因片段V(D)J (Variable-可变区; Diversity-多样区; joining-连接区;) 会发生随机重组,各基因片段可变形式分别为,V区(52种),D区(2种),J区(13种),配合V(D)J片段中碱基的插入和缺失,进一步相互间的排列组合存在1012种以上组合形式,以此构成了TCR和BCR多样性的来源,而这种多样性正是适应性免疫系统能够识别众多抗原的基础。个性化制定测序项目方面,满足从检测基因到蛋白的多组学测序要求。

其实,空间转录组的概念早就已经存在了,目前已经发表的空间转录组技术有 Slide-seq , LCM-seq , seqFISH, MERFISH , Liver single cell zonation , Geo-seq and Tomo-seq。但是这些方法存在操作复杂、检测精度不准确、基因和细胞检测量的限制等问题。10x Genomics公司升级spatial Transcriptomic后推出的Visium空间基因表达解决方案是一款商业化的高精度、高通量空间转录组测序方案。烈冰科技自2020年起,国内率先搭建空间转录组测序服务平台,联合上线单细胞核转录组测序、AbSeq、单细胞TCR-Seq、单细胞ATAC-Seq(ARCHR测序)、空间转录组测序产品结合scRNA-Seq服务,多组学联合助力科研人员探索时空等多维度、多角度的动态变化的生物学信息。烈冰生物为您提供贴心的单细胞研究完整解决方案!截至2021年10月,烈冰助力发表单细胞测序文章近20篇。南京BD VDJ测序

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