广州免疫组库测序平台

不同类型的细胞或者在不同的条件下，活细胞中染色质的结构是在不断变化的，比如说各种应激反应（stimulus response）和抗逆反应（stress response）等，也就是说染色质的可及性是会随细胞类型和外界刺激的改变而发生变化，而染色质开放区域的定向测序可以帮助我们了解细胞的转录调控过程，确定开放染色质的位置、转录因子的调控差异、核小体的调控区域和染色质状态等信息，确定哪些基因在细胞中具有转录活性。单细胞多组学测序是一种比较强大的表观遗传学研究工具，在开放染色质图谱绘制，细胞分化发育，疾病的致病机制，样本微环境等方面具有极大的应用前景。空间转录组测序以分子方式定义病理，完成了病理数字化结合病理影像化的革新。广州免疫组库测序平台

单细胞转录组测序是在单细胞水平上高通量测序分析基因表达谱的技术，突破传统高通量测序的局限性，组织解离后，单个样本一次上机能捕获500-20000个细胞， 基于每个细胞分别建库测序，获得单个细胞的基因结构和基因表达状态，并鉴定细胞的类型，可以在不同样本间从细胞类型的组成和丰度角度进行比较，反映细胞间的异质性。而2021年横空出世的10X Genomics Chromium X平台实现了单块chip上的百万级别通量的细胞捕获，系统实现16个通道同时运行，每个通道可捕获2000-20000个细胞（不混样），并支持原Chromium Controller体统外的多种细胞捕获百万级别通量实验，可准确鉴别稀有细胞类型和适配大规模单细胞研究。广州空间转录组测序平台烈冰专精单细胞多组学测序领域。

空间转录组测序与单细胞测序的结果不同，这里存在一个概念叫做Number of Spots under tissue，即，空间转录组片子上组织覆盖的有效的spot位点。这个有效Spot的筛选标准是有UMI以及有序列表达。那么这个时候，贴片的质量就成为了制约空间转录组有效区域的要点了。如果组织没有很好地覆盖到空转片上，那么容易出现虽然有HE染色有组织片子，但是没有基因表达，即无有效Spot位点。同样的，另一个就是组织切片的大小，也就是说组织切片在整个玻片的覆盖面积越小，分析的有效区域就越少。这两者基本上决定了整个空间转录组分析结果的基础质量。

空间转录组测序的数据分析基本分为三个阶段：1. 数据的预处理部分；2. Spot点阵的分群与定义；3. Spot分群的功能与生物学价值。每一个部分都不可或缺，其结果都对后续的分析结果有重要影响。由于空间转录组的序列结构与单细胞转录组测序的左端序列结构是非常接近的，都是Cellbarcode/SpotBarcode + UMI + 捕获区域这样的设计。右端普遍为捕获的RNA序列。因此采用单细胞的原始数据过滤策略即可，左端可以考虑切下捕获区域前的序列区域作为后续分析用的序列以减少分析负荷。随后，采用10X官方的Spatialranger的策略进行后续分析，解析出位于空间位置中的有效的Spot表达矩阵。全线搭建10x Genomics单细胞测序平台。

所谓的高通量测序技术，又名大规模平行测序，是将 DNA（或者 cDNA）随机片段化、加接头，制备测序文库，通过对文库中数以万计的克隆(colony)进行延伸反应，检测对应的信号并获取序列信息。与 传统测序法相比，高通量测序技术在处理大规模样品时具有强大的优势，又快（两天）又多（数百万克隆），成为目前组学研究的主要技术。单细胞测序是一个系统的工程，开展项目前您可能会先评估它提供的见解是否与您的研究问题相匹配，如果匹配，实验过程如何规划，实验平台如何选择，样本如何制备，数据如何分析等等，而在这一切开始之前，我们的服务就已经开始了，从销售到实验到专业技术支持，我们开通全线对接渠道，帮助您快速定位项目诉求，提供从实验设计到文章发表的全流程，我们始终是您贴心的科学合作伙伴。单细胞多组学测序可识别重要的转录因子，进行谱系和发育追踪。BD单细胞测序服务

烈冰智造PanoCell单细胞捕获，媲美国际主流的单细胞平台。广州免疫组库测序平台

针对单细胞测序的细胞数量判断环节：主要是对细胞数量、基因表达量、测序质量进行整体描述。过滤标准：由于细胞破碎后游离RNA会释放到环境或孔中，并且测序中也会存在一些死细胞，导致数据存在background值。因此，我们需要设定一定的标准来过滤掉假细胞或死细胞。以10× Genomics为例，细胞数量判断主要通过分析UMI Counts-Barcode曲线斜率拐点，当存在多个斜率拐点的时候，结合预期UMI=500时的细胞数量进行过滤。当斜率拐点低于UMI=500的时候，选择UMI=500作为细胞的判断的标准；否则，选择和预期细胞数量非常接近的拐点作为细胞判断的位置。这样我们能够有效获得真实的并且在基因数量上可以分析的数据。广州免疫组库测序平台

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