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时间:2022年08月31日 来源:

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取100-200 mg土壤样品,加入样品管中,然后加入400 ul土壤裂解液和20 ul 蛋白酶k,震荡混匀后,75℃加热裂解15分钟; b.最大转速离心5分钟,将上清液转移至新的样品管中,加入800 ul结合液,混匀; c.将上一步的混合液转移至硅基DNA吸附材料,分离液体和硅基DNA吸附材料; d.用漂洗液漂洗硅基DNA吸附材料; e.用洗脱液洗脱硅基吸附材料中的DNA; 2)PCR扩增及电泳 将上步纯化的DNA进行PCR扩增,在电泳仪中检测DNA。 本发明具有以下有益效果: 本发明的土壤尿液DNA提取试剂盒及方法,配制好土壤裂解液、结合液、漂洗液、洗脱液,利用特殊成分的土壤裂解液,在加入结合液之前,样品土壤来源的二氧化硅不与DNA结合,离心分离固体颗粒和溶解了DNA的上清液,上清液中加入结合液,混合后转入含有硅基DNA吸附材料中,分离液体和硅基DNA吸附材料,漂洗硅基DNA吸附材料,洗脱获得纯化DNA;

(a)土壤裂解液,其组成成分包括表面活性剂、螯合剂、pH缓冲剂; 所述表面活性剂为:十二烷基硫酸钠、十二烷基磺酸钠、月桂酰基肌氨酸钠、聚乙二醇辛基苯基醚、TWEEN 20、TWEEN 40、TWEEN 60、TWEEN 80、NP 40、十六烷基三甲基溴化铵中的一种或两种及以上的混合,所述表面活性剂的质量浓度为1-100g/L,推荐的表面活性剂成分是十二烷基硫酸钠或十二烷基磺酸钠中的一种或两种的混合,推荐的表面活性剂质量浓度为1-10g/L; 所述螯合剂为乙二胺四乙酸二钠、乙二胺四乙酸三钾中的一种或两种,所述离液盐的浓度为1-100 mmol/L;实验室用的土壤DNA提取推荐购买什么品牌?

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DNA Spin Kit,按照植物DNA提取protocol进行。FastDNA Spin Kit(11**40**0)。艰难样本:植物组织或坚硬、有韧性的样本组织,采用介质A。介质A中含有石榴石和氧化锆珠,能够有效的破碎植物组织,释放微生物。去杂提纯:植物中含叶绿素、多糖、多酚等抑制物,试剂盒中即有针对植物样本DNA提取而设计的裂解液CLS-VF及杂质去除剂PPS及漂洗液,能够很好的去除影响DNA纯化及下游实验的抑制剂。解决方案2:当作微生物样本看待,选择SPINeasy D网上订购土壤DNA提取的官网。闵行区土壤微生物DNA土壤DNA提取商家

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.53+0.03;1.09+0.03、1.51+0.05;1.37士0.03、1.43+0.03;0.81+0.02。提取不同土壤基因组DNA结果,有机营养土上样3μL其余土壤上样8μL;M: 1kb plus DNA ladder,Lane 1-4:自动化提取;Lane5-8:手工提取;Lane 1&5: 100mg有机营养土;Lane 2&6: 100mg花坛土;Lane 3&7: 250mg盐碱土;Lane 4&8: 250mg沙漠土。提取不同类型土壤DNA进行PCR及酶切结果。M: 1kb plus DNA ladder;Lane 1:有机营养土;Lane 2:花坛土;Lane 3:盐碱土;Lane 4闵行区FastDNA SPIN土壤试剂盒土壤DNA提取商家

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