武汉10X Chromium X单细胞测序多组学测序

时间:2022年08月08日 来源:

从单细胞测序描述性分析转向复杂样本中不同细胞类型的功能解析,越来越需要一种多组学的细胞生物学视角。通过单细胞多组学——即对不同组学的数据集进行分析和整合——科学家能够从同一个单细胞来源中检测多种细胞特征。这些特征包括全转录组基因表达、细胞表面蛋白表达、免疫组库序列(包括T细胞和B细胞受体)以及用于了解表观基因组调控的开放染色质区域。随着单个实验可提供更多信息丰富的数据,研究人员的获益更多,包括保留珍贵样本、提高生产力、减少因批次效应引起的错误,并节省更多的高科技资源(从资助基金到人员时间)。烈冰科技已建立了多种国际和国内主流的高通量测序实验平台。武汉10X Chromium X单细胞测序多组学测序

单细胞测序实验再样本细胞上机分选签,需要对细胞数量、细胞活性进准判断,这对SingleCell分选标记、建库、下机数据的质量都具有着决定性的作用。如若细胞计数偏高,将会影响建库的成功率;计数偏低,则会提高双细胞的比例;而细胞活率过低,就会使测序数据的利用率大打折扣,因此把好单细胞悬液质量这一关尤为重要。而在铺板过程中,由于不同操作人员手法具有不可避免的差异,不同的液体流速将直接影响单细胞的入孔效果。因此烈冰生物BDRhapsody单细胞分选平台配套了专门定制的电动移液器,其具有PrimeTreat、CellLoad、BeadLoad、Wash、Lysis、Retrieval多种操作模式,来对应各种不同的操作。通过已经设定的程序来控制液体的流速,大幅度降低人为操作习惯带来的差异,保证实验操作的一致性。南京二代测序单细胞测序数据分析可视化烈冰专研单细胞多组学测序领域。

对于单细胞测序而言,常常需要先构建细胞图谱,在此基础上再开展后续各项分析,并且数据分析时以细胞聚类(cellcluster)为讨论对象,而不是像常规Bulk测序一样以组别为分析对象,因此单细胞测序项目对样本入组要求没有Bulk测序那样严格,但是单细胞测序,特别是目的为图谱研究时,需要通过提高样本复杂度(增加样本数),尽可能的构建某一疾病类型、群体细胞图谱信息。因此,单细胞测序实验设计时首先需要保证生物学重复,不同样本来源的样本建议单独进行细胞解离和捕获、建库、测序,以保证捕获到足够的细胞数,单个样本分别捕获细胞时,后续分析除了整体分析以外,还可以做单样本分析,保证分析的完备准确性。

基因和基因产物并不是单独运作的,而是参与了相互关联的复杂通路、网络和分子系统,这些合在一起实现了细胞、组织和生物体的运作。定义这些系统并确定它们的特征和相互作用,对于了解生物系统如何运作至关重要。”为了推动科学发现,科学家们需要各种能够帮助多方位了解其样本的潜在生物复杂性的研究工具。对于越来越多的研究人员来说,单细胞RNA测序和单细胞多组学——即在单细胞分辨率下对基因表达及其他基于DNA、RNA或蛋白质的分析物进行定量分析的基因组方法——在帮助解决他们面临的生物学问题上已证实是行之有效的。烈冰实验室包含从样本处理到测序下机的全套实验平台。

针对单细胞测序的细胞上样数,为什么不建议捕获到的细胞数量越高越好?一味地追求高数量的细胞捕获可能会存在一些问题。例如在上机细胞悬液浓度固定时,如果目标细胞捕获数增加到8000甚至10000,上样细胞悬液体积势必增加,在细胞悬液质量不是很理想(细胞活性5%、结团率均>5%)的情况下,引入的背景信号会增加,分析结果不理想的直接体现包括:cell、non-cell无法有效区分和Fractionreadsincells偏低。当cell和non-cell无法有效区分时,会使得数据出现假阳性和假阴性结果!当目标细胞捕获数很大时,多细胞率会增加,数据分析时,此部分“cell”表现为基因检测数和UMI检测数是正常cell的N倍(N是一个GEM包裹的细胞数),导致所有细胞的统计数据(单个细胞基因检测中位数、单个细胞UMI检测中位数)虚高。此部分“cell”虽然可以通过设置数据分析阈值进行过滤,但是容易会有此类数据的残留和正常高基因检测细胞的人为去除!单细胞测序技术遍地开花,烈冰服务让您的医学研究如虎添翼。苏州10X单细胞测序服务机构

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烈冰生物成立于2010年,与时俱进,坚持为科研学者提供国际前沿的高通量测序实验和深度的生物信息数据分析服务,已逐步发展为单细胞多组学检测服务****。专注于“单细胞测序系列技术服务”的专精领域,在上海、北京、广州、西安和江西等地拥有数千平办公场所,并布局多中心产品研发生产基地和营销、运营中心。2016年起连续被评为上海市****,60+项自主知识产权,转化率近80%。产品覆盖从单细胞测序,核测序,单细胞多组学,空间转录组测序等多组学联合的实验+数据分析全流程服务平台。为600+国内高校和医院、5000+深度合作学者用户、10000+生命科学探索的重要科研项目在医药开发、科学研究、医学及临床研究,疾病分子标志物筛选、生命和神经发育研究等提供多层次、多组学检测服务和解决方案,助力300+CNS国际学术期刊文章发表,30+篇单细胞技术联合(助力)发文,IF10+文章占比>65%。武汉10X Chromium X单细胞测序多组学测序

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