陕西10X Genomics单细胞测序数据分析

时间:2022年08月21日 来源:

单细胞测序是指针对单个细胞进行全转录组测序分析,可精确地描述每一个细胞的状态,在异质性发育过程中具有特殊的应用价值。然而,单细胞测序无法给出固态异质化组织中细胞空间排布信息,对于揭示发育过程、病理微环境都存在很大的局限性。空间转录组测序以点阵形式记录病理切片细胞的空间信息并进行测序,可以精确指示点阵内的全部基因表达情况。空间转录组测序的加入,无疑让单细胞测序如虎添翼,更精确地勾勒了组织水平的异质性。高通量测序技术是对传统测序一次突破性的改变,一次对几十万到几百万条核酸序列进行测定。陕西10X Genomics单细胞测序数据分析

RNA测序(RNA-seq)或芯片分析等大量样本的转录组学方法作为一类强大的工具,可提供混合样本的基因表达平均数据,帮助科学家开始揭示这种异质性。随后,技术创新的飞跃在单细胞技术上达到新高度——使得科学家能够定义细胞类型特异的基因表达,从过去的平均数据中分辨出真正驱动其表达模式的细胞异质性。这让研究人员能够更详细地表征组织异质性,鉴定稀有细胞类型,并逐个细胞地仔细分析其分子机制。当获得了对其研究的生物系统更为真实的图谱后,研究人员就有了更为坚实可靠的知识基础,并能在这个基础上规划下一步实验,以获取更深入的可行动见解。上海10X Chromium X单细胞测序百万通量平台烈冰开展了单细胞转录组、单细胞多组学以及空间转录组等多种产品在内的全套科研解决方案。

基因和基因产物并不是单独运作的,而是参与了相互关联的复杂通路、网络和分子系统,这些合在一起实现了细胞、组织和生物体的运作。定义这些系统并确定它们的特征和相互作用,对于了解生物系统如何运作至关重要。”为了推动科学发现,科学家们需要各种能够帮助多方位了解其样本的潜在生物复杂性的研究工具。对于越来越多的研究人员来说,单细胞RNA测序和单细胞多组学——即在单细胞分辨率下对基因表达及其他基于DNA、RNA或蛋白质的分析物进行定量分析的基因组方法——在帮助解决他们面临的生物学问题上已证实是行之有效的。

相对于Smart-Seq技术在细胞数量上的问题,10X平台普遍提供的细胞数量都在1000-20000不等的测序细胞量,这个量级的测序细胞量已经可以说能够完全覆盖绝大部分组织的SingleCell群体类型。因此,这两种技术对于基于基因表达进行准确细胞分型上,无论是从细胞数量上来说还是表达检测可靠性来说,都会更实用。同时依托RandomCellLabel技术,使得其对于NovaSeq、HiSeqXTen、Hiseq4000等设备存在的Indexhooping现象,相对于Smart-Seq数据来说,影响几乎可以忽略不计(10XGenomics官方网站曾给出hooping测试结果,显示无影响。十二年测序经验,烈冰生物单细胞多组学领域的佼佼者。

10X Genomics单细胞转录组测序是利用单细胞水平上的高通量测序分析基因表达谱的技术,也是目前国内和国际上公认的单细胞测序大规模实验平台技术,该平台基于动态微流控原理,突破传统高通量测序的局限性,组织解离后,单个样本一次上机能捕获500-20000个细胞, 基于每个细胞分别建库测序,获得单个细胞的基因结构和基因表达状态,并鉴定细胞的类型,可以在不同样本间从细胞类型的组成和丰度角度进行比较,反映细胞间的异质性,提供足够灵活的定制测定法以满足多种实验需要,并有效缩短实验是时间和降低测序成本。单细胞测序技术的迅速发展和应用推广,为从多维度揭示疾病发展提供了强有力的工具。单细胞测序百万通量平台

烈冰生物首批引进 Chromium X 平台,开启百万级通量单细胞测序新时代。陕西10X Genomics单细胞测序数据分析

单细胞测序结果动辄上百G数据量,庞大的数据对于分析平台和分析能力有着很高的要求,首先针对下机数据的质控环节:单细胞测序产生数亿的结果序列,不可避免的会出现低质量的测序结果,存在各种情况的序列污染。因此序列过滤及质量评估就会变得极为重要。序列质量主要通过测序质量值Q20/Q30的占比来表征,即碱基测序结果的错误率在1%/0.1%以下的比例。理想的测序结果reads的碱基质量均高于30。保证数据获得后的处理结果的准确性,为后续细胞类型鉴定和功能分析打下坚实基础。陕西10X Genomics单细胞测序数据分析

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