广州scRNA单细胞多组学数据分析

时间:2022年08月22日 来源:

单细胞测序技术的不断发展解决了以往群体细胞组学分析面临的两个瓶颈:一是大量细胞的混合测序会掩盖细胞间的异质性;二是传统的测序技术需要大量的细胞作为起始,细胞数目稀有的样品则难以研究.利用单细胞测序方法不仅能够揭示组织中的细胞类型和稀有亚群、细胞状态和命运的变化,还可以研究细胞数稀有的珍贵样品,从而帮助人们理解发育、衰老和疾病发展的机制。随着单细胞转录组、基因组、表观遗传组、蛋白组等各组学测序技术的快速发展,研究者开始将它们相互组合,使得单个细胞或同类细胞的多个组学数据能够联合分析.因此,利用单细胞多组学技术能够更有效地研究细胞在特定时空状态下各组学间的复杂联系,从而揭示细胞状态和命运调控的分子机制。单细胞多组学测序技术是在单细胞分辨率下精确分析细胞异质性和基因调控网络的新技术。广州scRNA单细胞多组学数据分析

当下,单细胞测序已经广泛应用于多种疾病发展过程中的关键过程和事件,如疾病从轻症病变向恶性的转化、恶性向转移病变的发展,以及疾病对多种药物的反应等等。单细胞测序技术作为一个需要将组织解离成为单细胞悬液,或者是采用细胞核捕获的策略捕获单细胞核,进而对于每一个单细胞或者细胞核进行测序得到结果的技术,其空间定位信息是丢失的。这就衍生出了一个问题就是如果单细胞A与B并不出现在一个组织区域中他们会互相影响或者转化么?免疫研究中,两个具有非常强的PDL1-PD1的配对关系的细胞在组织切片上风马牛不相及,这样PDL1-PD1的关系会生效么?成都烈冰生物单细胞多组学平台,从多组学的角度对单细胞进行综合分析 将是未来单细胞技术的必由之路。

单细胞多组学测序技术的发展依赖于各种单一组学检测技术的完善,但即使在单细胞测序技术迅速发展的情况下,在单细胞水平协同检测多个不同的分子层面仍然非常具有挑战性.每一种组学都有不同的特性和测量方法,这些方法在敏感性、特异性、通量和适用性上都有所不同.因此,在单细胞水平对多种组学方法进行整合和应用时,需要在策略上做出改进,以保证各组学间的上游建库以及下游生物信息分析均能良好地兼容,同时也要明确技术的局限性及其对研究结果的潜在影响。

空间转录组测序与单细胞测序的结果不同,这里存在一个概念叫做NumberofSpotsundertissue,即,空间转录组片子上组织覆盖的有效的spot位点。这个有效Spot的筛选标准是有UMI以及有序列表达。那么这个时候,贴片的质量就成为了制约空间转录组有效区域的要点了。如果组织没有很好地覆盖到空转片上,那么容易出现虽然有HE染色有组织片子,但是没有基因表达,即无有效Spot位点。同样的,另一个就是组织切片的大小,也就是说组织切片在整个玻片的覆盖面积越小,分析的有效区域就越少。这两者基本上决定了整个空间转录组分析结果的基础质量。烈冰生物首批引进 Chromium X 平台,开启百万级通量单细胞测序新时代。

所谓的高通量测序技术,又名大规模平行测序,是将DNA(或者cDNA)随机片段化、加接头,制备测序文库,通过对文库中数以万计的克隆(colony)进行延伸反应,检测对应的信号并获取序列信息。与传统测序法相比,高通量测序技术在处理大规模样品时具有强大的优势,又快(两天)又多(数百万克隆),成为目前组学研究的主要技术。单细胞测序是一个系统的工程,开展项目前您可能会先评估它提供的见解是否与您的研究问题相匹配,如果匹配,实验过程如何规划,实验平台如何选择,样本如何制备,数据如何分析等等,而在这一切开始之前,我们的服务就已经开始了,从销售到实验到专业技术支持,我们开通全线对接渠道,帮助您快速定位项目诉求,提供从实验设计到文章发表的全流程,我们始终是您贴心的科学合作伙伴。单细胞多组学测序主要包含细胞分离、文库构建、高通量测序和生物信息学分析等步骤。青岛single cell 单细胞多组学测序服务

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空间转录组测序的数据分析基本分为三个阶段:1.数据的预处理部分;2.Spot点阵的分群与定义;3.Spot分群的功能与生物学价值。每一个部分都不可或缺,其结果都对后续的分析结果有重要影响。由于空间转录组的序列结构与单细胞转录组测序的左端序列结构是非常接近的,都是Cellbarcode/SpotBarcode+UMI+捕获区域这样的设计。右端普遍为捕获的RNA序列。因此采用单细胞的原始数据过滤策略即可,左端可以考虑切下捕获区域前的序列区域作为后续分析用的序列以减少分析负荷。随后,采用10X官方的Spatialranger的策略进行后续分析,解析出位于空间位置中的有效的Spot表达矩阵。广州scRNA单细胞多组学数据分析

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