基因转染试剂配制

原代细胞直接分离自组织并在适当条件下增殖。因此，它们的形态学和生理特征和体内状态更为相似。但相对于连续细胞系，它们通常更难培养和转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。源自于原代培养物的细胞系具有有限的寿命（即它们是有限细胞系），且随着传代的进行，具有比较高的生长能力的细胞逐渐占据支配地位，从而造成了细胞群内的基因型和表型接近一致的情形。相对来说，这一类细胞要比原代细胞使用起来更为方便，尤其是稳定转染的克隆传代。RNAiMAX转染试剂是先进、高效的siRNA输送解决方案。基因转染试剂配制

转染是将外源核酸导入真核细胞的过程，是细胞和分子生物学研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了"，真所谓辛辛苦苦实验N多回，一夜回到解放前……众所周知，影响转染成功的因素非常多，包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同，现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。阳离子聚合物转染试剂购买连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理.

在难转染细胞（原代大鼠动脉平滑肌细胞）转染效率的比较图片由芝加哥大学肺和重症护理系的NickolaiDulin博士友情提供制备大鼠的动脉平滑肌原代细胞并用使用LipoD293™试剂（左图）和Lipofecatmine2000（L2K,右图）分别将GFP的cDNA（pEGFP-N3）按照生产制造商的转染操作步转染至该细胞。转染24小时后，用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光，以此来评价转染效率。对难转染细胞LNCap细胞转染效率的比较在难转染细胞（原代大鼠动脉平滑肌细胞）转染效率的比较图片由罗斯威尔公园**研究所（RoswellCancerInstitute）

细胞转染过程:X-tremeGENE9DNA转染试剂简介：X-tremeGENE9DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。优势：1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE9DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化所见即所得——分享两款超好用的转染试剂,拯救你的细胞.

用LipoD293™体外DNA转染试剂（Ver.II）（上图）和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™（下图）转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后，细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较/30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达，用量为LipoD293™试剂，20微克，所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。riboFECT CP转染试剂应用案例,可转染各种细胞,靠谱!基因转染试剂配制

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基于阳离子聚合物的转染试剂，带正电的聚合物与核酸带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后与细胞表面带负电的蛋白多糖相互作用，并通过内吞作用进入细胞。其又分为树枝状阳离子聚合物和线性阳离子聚合物两类，前者细胞毒性相对较大，后者细胞毒性较小，但其转染效率都高于脂质体转染，适用也较为广范。以上单一成分的转染试剂或聚焦于提高效率或着重于降低细胞毒性，可谓鱼和熊掌不可兼得也。新一代转染试剂，不局限于单一成分，混合了不同配方的脂类（非脂质体）、加上蛋白质组分、以及各种的成分，兼具了转染效率高和细胞毒性小的优势，且操作更加简单，易于高通量。基因转染试剂配制

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