多重PCR核酸检测

时间:2023年09月18日 来源:

目前市面上有很多PCR仪器,一时间让兽医师无从选择,但大多数都是PCR扩增仪,即需要人工进行核酸提取和纯化。他们都有以下痛点:1、核酸提取和纯化的操作麻烦并且需要专业的技术人员和场地,有些还需要配置高速离心机,人工核酸提取需要30~40分钟并容易导致污染。2、人工反复开盖加入或倒出试剂,容易导致人为和气溶胶污染,导致结果不准确。因此针对宠物医院来说,需要一台集核酸提取、纯化和扩增为一体的全自动核酸检测仪。能更好的控制人工成本及试剂成本。常用的qPCR方法有荧光染料法(SYBR Green I)和探针法(TaqMan)。多重PCR核酸检测

多重PCR核酸检测,PCR

巧亦捷核酸一体机采用的探针法荧光PCR与常规PCR的不同之处在于:在上、下游引物外还加入了具有序列特异性的探针(探针本身具有荧光标记),该探针根据需要扩增的靶序列设计因此只能与待检测序列结合,与染料法相比提高了实验的特异性。目前市场上的探针主要种类有:TaqMan、MolecularBeacon、Scorpions、Hybirdization等,其中以TaqMan探针应用宽泛。TaqMan探针的结构:长度与普通PCR引物类似,大约20bp左右。在5’与3’端各标记有一个荧光基团,5’的荧光基团称为报告基团(Report),3’的荧光基团称为淬灭基团(Quencher)。TaqMan探针的性能:在探针结构完整的情况下用特定的波长激发报告基团,由于报告基团与淬灭基团的空间位置很近,因此报告基团能够通过FRET(FluorescenceResonanceEnergyTransfer)将接受的能量转移到淬灭基团,使后者以发射荧光或热量的方式释放能量,而报告基团并不发射特定波长的荧光信号。多重PCR核酸检测PCR技术是一种用于扩增特定DNA、片段的分子生物学技术。

多重PCR核酸检测,PCR

大多数宠物医院运用的诊断方法为:PCR和试纸条。其区别是:试纸条原理是基于抗体抗原的免疫学方法,通过颜色或荧光标记来判读,和PCR检测是基于不同方法学的检测方式。PCR通过检测样本中有无病毒DNA(RNA)来确诊,灵敏度高、特异性强、支持检测项目多,是人医医学界公认的诊断金标准,两者区别可以理解为滴血认亲(免疫学方法)与亲子鉴定(分子诊断)的区别。目前专业的的宠物疾病机构就是使用PCR检测。巧亦捷核酸检测一体机采用国际**的薄膜微流控技术,实现了从核酸提取、PCR扩增、荧光检测全流程自动化芯片内完成,可以实现专业实验室级别的核酸检测,且检测时间短,全程无需专业技术人员参与,可实现基于病症的多项目联检,更适合宠物医院、兽医站、养殖场等现场快检应用场景。

样本处理、核酸提取、PCR扩增和数据处理是PCR的四个步骤。其中核酸提取可以帮助研究人员准确地快速地分离细胞或分子材料中的有效核酸,并获得足够的样本为后续实验提供依据。无论是病毒、细菌还是体细胞,遗传物质都不是裸露在细胞外,都是在细胞内。需要有一个核酸提取试剂将遗传物质释放到外界,保证PCR反应效率。将核酸释放出来后,提取与纯化过程中同样需要将样本中的一些PCR抑制物去除掉,获得纯度比较高的核酸,比较大限度的保证PCR反应中抑制物的浓度降低,提高核酸检测的准确性。因此核酸提取与纯化这一步,也是保证PCR反应结果的关键一步。巧亦捷核酸检测一体机采用磁珠法提取,效率高且可确保结果更准确。宠物医疗服务包括为宠物提供疾病诊疗和日常保健服务,是宠物行业中*次于宠物食品的第二大细分行业。

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巧亦捷核酸检测一体机有以下几点优势:1)、灵敏度高,显1著缩短窗口期,解决了潜伏期检测不出的问题。由于PCR的检测域远比测试纸广,在机体带毒的早期阶段(潜伏期),虽然病毒快速繁殖,但是测试卡却无法检出,巧亦捷核酸一体机就不存在潜伏期检测不出的问题;2)、特异性好:巧亦捷使用荧光探针技术,几乎没有方法学的假阳性;可直接揭示病原体的存在;3)、检测所需样本量少:只要少量的血液(0.2cc),少量的口鼻分泌物,就可以做出多个疾病项目;4)、用于体检筛查:特别是体弱或者老年动物,定期的体检筛查显得格外的重要,使用巧亦捷核酸一体机可协助医师早期发现疾病,把疾病消灭在早期阶段,延长宠物的寿命,从而提高从宠物福利;5)、用于鉴别诊断:当临床上出现类似症状的疾病时,核酸一体机可协助医师做出准确的诊断,提高临床的诊断率和治、愈率。无论是由病毒、细菌,还是原虫、寄生虫等引起的犬猫传染性疾病都可利用巧亦捷核酸一体机进行诊断。动物疫病PCR动物检疫

巧亦捷全自动核酸一体机无需专业检测人员,仪器上样简便,软件操作易于掌握。多重PCR核酸检测

PCR技术是从DNA水平对病原进行检测,将病原DNA进行大量的扩增,在通过多种途径对扩增后的产物进行检测,胶体金检测方法虽然快速、便捷的,但是该种方法是从蛋白水平对病原进行检测,故存在一定的交叉反应和动物自身抗体干扰,导致临床应用的过程中出现假阳性和假阴性的结果,巧亦捷核酸检测一体机采用的PCR技术从根本上避免了检测呈现假阳性或弱阳性的结果,极大提高了检测的灵敏性和特异性。此外,利用PCR引物的高度特异性,可以排除其他所有非致病原体的干扰,实现精确的诊断,与其他检测方法相比具有不可比拟的优势。多重PCR核酸检测

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