上海基因转染试剂

LNCap细胞的培养和传代严格由ATCC建议的操作步骤进行，与pBabe-hygro-SSeCKs（1.5ug）和pEGFP-N3（1:1，共1.0微克）共转染（6孔板中每孔的量），并用LipoD293™试剂（左图）和FugeneHD（右图）分别按照生产制造商的科学实验步骤进行转染。转染24小时后，用尼康Eclipse2000荧光显微镜检测GFP荧光，以此来评价转染效率。在血清和***的存在下，HepG2和SaoS-2细胞用pEGFP-N3和pSV-β-半乳糖苷酶DNAs分别转染达到95%的细胞融合。转染48小时后，分别通过Zeiss510激光共聚焦显微镜和β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测效率。转染复合物制备完成； 混匀后室温下孵育15-20分钟，直接取10μL加入已铺好细胞的孔中.上海基因转染试剂

细胞转染过程:X-tremeGENE 9 DNA 转染试剂   简介：

X-tremeGENE 9 DNA转染试剂是脂质和其它成分混合而得的一类多组份试剂，溶于80%乙醇中，经0.2 μm滤膜过滤，然后封装于玻璃小瓶中，适用于细胞分析的多种实验。

优势：1.具有细胞毒性极低、转染后细胞存活率高，生成可信任的生理学相关数据。

2.操作简便、节省时间，只需对X-tremeGENE 9 DNA转染试剂进行简单稀释，再与质粒DNA共同孵育，即可直接向细胞添加反应混合物(有无血清均可)。

3.对于常用细胞无需进行费时费力的优化工作。 上海基因转染试剂连续细胞系具有无限增殖的潜能，通常要比原代或有限细胞更易处理.

用LipoD293™体外DNA转染试剂（Ver.II）（上图）和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™（下图）转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后，细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达，用量为LipoD293™试剂，20微克，所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。

细胞转染是指将外源基因如DNA，RNA等导入细胞内的技术。随着分子生物学的发展，转染已经成为研究和控制细胞基因功能、实现基因调控的常规工具。市场上各种转染试剂琳琅满目，各有千秋，然而没有任何一种转染试剂可以能够适用于所有细胞种类、满足所有实验需求和目的，成分控认为转染试剂的成分及作用机理对转染效果及细胞生理作用影响***，是转染试剂选择的重要依据，选试剂时要留意成分哦。严格来讲，转染的方法可以基于化学法、物理法（电穿孔、显微注射等）以及***介导法，没有一种方法是放之四海而皆准。作为成分控的小编，本次主要为大家介绍基于各类转染试剂的化学法转染。在经过***次传代培养之后，原代培养物变成了一种细胞系。

用 LipoD293™ 体外 DNA 转染试剂（Ver. II）（上图）和受欢迎的品牌产品 Invitrogen 公司的 293fectin™（下图）转染 pEGFP-C1 质粒到 HEK293 细胞中。转染 24 小时后，细胞的尼康 Eclipse 荧光显微镜 DIC 成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。

对悬浮 HEK293F 产生蛋白质效率的比较/

30 毫升的 293F 细胞分别使用 LipoD293™试剂、293fectin、Xfect 和 Fugene 6 等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将 pEGFP-6xHis 质粒导入细胞表达，用量为 LipoD293™ 试剂，20 微克，所有其他三种转染试剂均使用 30 微克质粒 DNA。 包括**常见的DNA，用于基因编辑的siRNA，能够更快表达蛋白的mRNA，CRISPR-Cas9甚至是体内转染。上海sirna转染试剂

siRNA脱靶效应会导致细胞死亡，并引起分析问题。上海基因转染试剂

对 HepG2 细胞转染效率的比较

右图：使用以上转染试剂将 GFP 的 cDNA（pEGFP-N3）按照生产商的提供的转染步骤转染到 HepG2 细胞（在胶原预处理的培养皿中培养）。在转染 48 小时之后，用流式细胞仪检测 GFP 阳性细胞（%）和荧光强度。

左图：血清和***存在的条件下能提高 LipoD293 试剂（升级版）对在 HepG2 细胞的转染效率。通过三种不同的条件下转染 HepG2 细胞（生长在胶原处理的培养皿上）---无血清和***，10% 血清和***的存在，转染 5 小时后换液和不换液。

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