原代细胞转染试剂多少钱

转染是将外源核酸导入真核细胞的过程，是细胞和分子生物学研究的重要工具，也是大部分的生物和分子生物领域的科研党们绕不开的话题。然而常常听到的抱怨是"转染效率太低""转染完细胞全漂了""转染后忘记给细胞换液了"，真所谓辛辛苦苦实验N多回，一夜回到解放前……众所周知，影响转染成功的因素非常多，包括细胞质量、核酸质量、微生物污染、转染试剂等。各种细胞使用的转染条件都可能不同，现实中也并没有一种放之四海而皆准的方案。将EntransterTM-R4000稀释液和agomir稀释液充分混合.原代细胞转染试剂多少钱

基于磷酸钙成分的转染试剂，其主要作用原理是与DNA通过沉淀反应形成磷酸钙-DNA复合物，粘附到细胞膜表面，借助内吞作用进入细胞质。pH值，钙离子浓度，DNA浓度，沉淀时间，细胞孵育时间乃至各组分加入顺序都可能对结果产生影响，因此实验条件摸索和优化时间较长，且重复性不佳。基于脂质体的转染试剂包括中性脂质体和阳离子脂质体两种。中性脂质体是利用脂质膜包裹DNA，借助脂质膜将DNA导入细胞膜内。目前应用比较***的是带正电的阳离子脂质体转染试剂，DNA并没有预先包埋在脂质体中，而是带负电的DNA自动结合到带正电的脂质体上，形成DNA-阳离子脂质体复合物，从而吸附到带负电的细胞膜表面，经过内吞被导入细胞。此方法操作简单，重复性好，在体外转染中有很高的效率，但具有一定的细胞毒性，可能会干扰细胞的代谢。且活性受血清影响，需要去除血清。原代细胞转染试剂多少钱转染的细胞类型可简单分为两大类，连续细胞系和原代细胞。

简介：X-tremeGENE HP DNA转染试剂是一种高效的无动物源成分的低毒转染试剂，兼容含血清或不含血清的培养基，可用于转染各类真核细胞(包括昆虫细胞)以及多种难转染细胞系。优势：

1.简单易用的多组分混合试剂，无动物源性成分，室温稳定。

2.高转染效率，对于原代细胞和使用其它试剂难转染的**细胞系有高转染效率。

3.使用细胞毒性低的试剂，结果相关性好。

图2. X-tremeGENE HP高效低毒的转染性能。通过X-tremeGENE HP和脂质体转染方法将GFP表达质粒转染至CHO-K1。A和C图的荧光视野显示了实验后两种方法均获得了成功转染的细胞。但B和D图的明亮视野表明脂质体转染方法的细胞毒性远高于X-tremeGENE HP，导致存活细胞量减少(图片来源于网络)。

用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得：只需简单地混合，并进行孵育（30min）、稀释、及注射即可。

靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果

使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物，以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射，**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低（使用TaqMan分析对敲低进行评估）。 将20μL转染复合物加入孔中的细胞悬液中，前后移动培养皿，混合均匀；

用LipoD293™体外DNA转染试剂（Ver.II）（上图）和受欢迎的品牌产品Invitrogen公司的293fectin™（下图）转染pEGFP-C1质粒到HEK293细胞中。转染24小时后，细胞的尼康Eclipse荧光显微镜DIC成像图（左侧）和荧光成像图（右侧）。对悬浮HEK293F产生蛋白质效率的比较30毫升的293F细胞分别使用LipoD293™试剂、293fectin、Xfect和Fugene6等转染试剂按照生产商的标准转染步骤将pEGFP-6xHis质粒导入细胞表达，用量为LipoD293™试剂，20微克，所有其他三种转染试剂均使用30微克质粒DNA。siRNA脱靶效应会导致细胞死亡，并引起分析问题。上海罗氏转染试剂推荐

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图3. 用于转染的Invivofectamine 3.0试剂及RNAi复合物非常容易获得：只需简单地混合，并进行孵育（30min）、稀释、及注射即可。

高效、靶向敲低

在实验靶标中可观察到高达85%的敲低效果

图4. 使用Invivofectamine 3.0试剂可在单次静脉注射后即可在肝脏中实现靶向敲低。Invivofectamine 3.0试剂与靶向Factor VII (FVII)或PPIB mRNA的siRNA组成的复合物，以每千克小鼠体重1 mg(mg/kg)的注射量进行注射，**终靶向mRNA水平出现了高达85%的敲低（使用TaqMan分析对敲低进行评估）。 原代细胞转染试剂多少钱

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