江西琼脂培养基 培养基制备器

培养基制备器-培养基使用规程：1.目的：规范本中心微生物实验室培养基的使用和管理。2.适用范围，本规程适用于培养基的储存、融化和废弃等。3.职责，3.1检验人员：按照本规程规范使用培养基、定期检查培养基是否失效。3.2科室负责人：负责指导、监督检验人员规范使用培养基。4.使用程序，4.1培养基的储存，4.1.1除特殊说明和标准规定，通常情况下基础培养基（如营养琼脂培养基）应在4℃冰箱中保存不超过3个月，或在室温（20℃）下保存不超过一个月。培养基制备器完全灭菌后用于单种微生物培养和鉴定，一般都是在无菌状态下储存，定量使用的。江西琼脂培养基 培养基制备器

培养基的物理灭菌方法：（一）加热灭菌法：加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时，有水分存在，蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿，湿热的穿透力比干热大。常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。（二）紫外线灭菌法：是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。一般用于灭菌的紫外线波长是200~300nm，灭菌力较强的波长是253.7nm。紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。江西琼脂培养基 培养基制备器培养基制备器利用与外部水连接的盘状热交换器，能够使内部迅速冷却。

培养基的分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎（现试管一般多有用螺旋盖者）。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为洽当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。

培养基各成份的混合和溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。使用的蒸煮锅不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。好好使用不锈钢锅加热溶化．也可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时扰动，以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。待大部分固体成分溶化后，再用较小火力使所有成分完全溶化．迄至煮沸。如为琼脂培养基，应先用一部分水将琼脂溶化，用另一部分水溶化其它成分，然后将两溶液充分混合。在加热溶化过程中，因蒸发而丢失的水分，较后必须加以补足。培养基通常采用高压蒸汽灭菌。

培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源（生长因子）等。（1）碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。（2）氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。培养基还要满足微生物生长对PH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。培养基制备器血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。自动搅拌培养基制备器售后

有时需要在培养基中加入消泡沫剂以减少泡沫的产生，或适当提高灭菌温度。江西琼脂培养基 培养基制备器

微生物检验培养基制备的要点：称取数量，用1/100的电子天平称出培养基所需的药物。首先参照配方计算出配制相应培养基需要各成分的数量，然后用电子天平准确称取重量（将称量纸折叠成簸箕盛药）。培养基过滤，如果对配制的培养基没有特殊要求，这一步可以省略。中'海培养基如有浑浊和沉淀现象，可将需要澄清的液体培养基用油纸过滤。固体介质可以用双层纱布过滤，中间有一层薄薄的脱脂棉。如果过滤法不能满足澄清要求，可以采用蛋清澄清法，即将培养基加热冷却至五十度至六十度，不超过三角瓶一半的容量。每一千毫升放入1~2个蛋清，用力摇晃三至五分钟，用121℃高压蒸汽灭菌二十分钟，趁热取出过滤。江西琼脂培养基 培养基制备器

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