江苏品牌EdU细胞增殖检测试剂盒原理

BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较。A.BrdU法需使用大分子的BrdU抗体，由于空间位阻，双链DNA须变性后才能使BrdU抗体与BrdU结合。法使用小分子标记的叠氮化物(Azide)，无需DNA变性，操作更便捷，兼容性好，检测结果更加稳定可靠。本试剂盒检测快速。相对于BrdU法，本试剂盒采用BeyoClick™EdU法检测新合成的DNA，所需时间缩短。经本试剂盒处理后，增殖的细胞呈棕色，可以用普通光学显微镜进行观察。HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果参见图3。图3.HeLa细胞用本试剂盒检测细胞增殖的效果图。无EdU组观察不到棕色染色(左侧一列)；EdU(10μM)孵育2小时组有明显的棕色染色(中间一列)；而用10mM的DNA合成抑制剂羟基脲(Hydroxyurea)提前预处理0.5小时后，棕色染色减弱，说明DNA合成被抑制后，EdU的掺入被抑制(右侧一列)。EdU细胞增殖检测试剂盒的优点体现在哪？江苏品牌EdU细胞增殖检测试剂盒原理

EdU细胞增殖检测试剂盒直接测定DNA合成是细胞增殖检测的准确方法之一开发的EdU细胞增殖检测试剂盒采用另外一种胸腺嘧啶核苷酸类似物-EdU（ 5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷），在细胞增殖时EdU能够插入正在复制的DNA分子中，利用EdU与染料之间的点击化学反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析，可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色（BrdU）检测方法相比(图1)，更简单，更快速，更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500，在细胞内更容易扩散，不需要严格的样品变性（酸解、热解、酶解）处理，有效地避免了样品损伤，有助于在组织的整体水平上观测细胞增殖的真实情况，具有更高的灵敏度和更快的检测速度。EdU分析方法反应条件比较温和，我们提供的一系列Andy Fluor™ 染料标记可以用于多色通道选择，也可以用于培养细胞分析及组织切片分析江苏提供EdU细胞增殖检测试剂盒价格上海东寰与您分享EdU细胞增殖检测试剂盒的重要性。

EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液，制成2xEdU标记培养基；(b)提前将2xEdU标记培养基预热，然后等体积加入到细胞原有培养基中，获得lxEdU溶液，其中EdU的终浓度为10uM；注：1)我们不建议替换全部培养基，因为这样可能会影响细胞增殖的速度；2)配置好的培养基建议现用现配，用量以没过细胞为宜；(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时，弃培养基；注：1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态；2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次，毎次5分钟，以除去未掺入DNA的EdU残留。注：贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。

细胞增殖分析是细胞生长和分化研究的关键，在药物开发阶段常用来评估化学药物的毒性和对细胞生长的控制作用。通常根据平均DNA含量或细胞代谢参数进行细胞增殖检测，此类分析可以报告出总细胞数目和活细胞数目，或者测定出单个细胞内的DNA合成情况。细胞增殖染料稀释分析主要基于细胞膜通透性，荧光团分子、染料进入细胞后，将会共价结合到蛋白质上的氨基基团上，从而使染料能够长时间停留在细胞中。经过之后的细胞分裂阶段，各个子代细胞会从母细胞中接收到大约一半的荧光染料。采用流式细胞仪对荧光强度进行分析，即可测定出自标记结合起，单个细胞或细胞群所经历的传代数目。EdU细胞增殖检测试剂盒价格。

细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物，其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见，能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中，EdU细胞增殖检测试剂盒通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应，把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面，这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性，广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的运用方式。上海品质好的EdU细胞增殖检测试剂盒优势

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上海东寰活细胞能将四咪唑盐（如MTT、XTT、WST-1）还原成有色的甲瓒或甲瓒盐（Formazan），可通过分光光度计或酶标仪进行检测。CellCountingKit–8（96992）和CellProliferationReagentWST-1中的WST-8被细胞内脱氢酶生物还原后生成的橙色甲臜染料能够溶解在组织培养基中，生成的甲臜量与活细胞数量成正比。基于CCK-8（WST-8）的试剂盒能高度准确地检测细胞增殖，比MTT法及XTT法的灵敏度高5倍，能检测更低的细胞数目。该试剂盒可适用于96孔板培养的贴壁或悬浮细胞。江苏品牌EdU细胞增殖检测试剂盒原理