IVD数字ELISA使用效果
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
单分子酶检测到的比较低酶分子数假设蛋白质检测分析的更终灵敏度为背景信号可能由非特异性相互作用产生。为了评估内在敏感性,我们通过将400,000个带有生物素的珠子与不同浓度的酶缀合物链霉亲和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,创建了具有明确酶与珠子比例的珠子群体。为了方便起见,生物素化珠子是通过将生物素化DNA与功能化的珠子杂交提供的。互补DNA。[我们注意到,该实验不应被视为敏感的DNA检测;该检测的敏感性受到非特异性相互作用的限制,如补充图2所示,这些相互作用发生在酶缀合物和表面结合的DNA之间。 单分子POCT产品-数字化ELISA芯片,帮您数字化高灵敏检测,且微量样本多重指标检测;IVD数字ELISA使用效果
芯弃疾JX-8B数字ELISA 具有超敏的优点:
检测方法为阵列成像。阵列成像涉及对阵列中的每个孔进行检测以确定是否存在微球并判断微球是否具有酶活性。为此,开发了一种图像分析软件,该软件首先创建一个阵列的“掩模”,以定义孔定位和边界进行检测。然后将孔掩模应用于阵列的荧光图像,以确定孔内微球和酶的存在。对于阵列的荧光图像,当进行多重检测时,会生成微球群体或微球亚群的荧光强度直方图。直方图中的峰值自动识别并用于确定微球群体。阵列单分子数字ELISA使用速度芯弃疾JX-8B数字ELISA,微量检测,使用10uL样本就能测试;
芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;
单分子的检测原理:由Simoa数字免疫分析法实现的超灵敏度已在先前讨论过。简而言之,类似免疫分析中的酶-底物反应是在相对较大的反应体积(50-100µL)中进行的,在信号生成步骤中稀释了产物分子。信号分子的扩散和稀释将灵敏度限制在皮摩尔范围内。相比之下,Simoa通过将单独标记的免疫复合物和底物限制在飞升大小的孔中,从而限制了荧光产物分子从酶-底物反应中的扩散。当单一酶标签催化底物转化为荧光产物时,产生的荧光团被限制在孔中,从而在短时间内产生可测量的荧光信号。
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。蛋白质生物标志物在区分健康和疾病状态方面的临床应用,而监测疾病进展则需要测量复杂样品中的低浓度蛋白质。目前的免疫测定方法测量的是蛋白质的浓度高于10−12M,6而大多数在病症7、神经疾病8,9和接触早期阶段10中重要的蛋白质的浓度被认为在10−16到10−12M之间。需要提高灵敏度的例子包括:一个由一百万个细胞组成的1毫米³疾病,每个细胞分泌5000种蛋白质到5升液体中。Simoa®由现任于哈佛大学医学院的DavidWalt教授作为科学创始人于2007年创立。DavidWalt是美国的工程院,艺术院和医学院三院院士。2010年,DavidWalt将Simoa®技术以封面文章的形式发表在《NatureBiotechnology》上,此技术开始为大众所知并引起业界轰动。Simoa技术(Single-moleculeArray,Quanterix公司)特点是通用阵列化检测,实现超高的灵敏度,较传统ELISA方法能够高出3个数量级,达到飞克级别(fg/ml)甚至更低。已拿阿兹海默症的两个FDAbreakthroughdevice;通常用于各种科研方向:神经因子、蛋白组学、细胞因子等。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,微量样本可同时测2-4个指标;!
芯弃疾JX-8B数字ELISA,我们为什么能做到?产品主要原理同单分子阵列技术:
非常近,已经描述了两种数字蛋白质测量方法,这些方法能够提高对单分子水平的灵敏度。一种方法依赖于在固相上形成免疫三明治复合物,然后化学解离并通过激光计数每个分子。第二种方法由美国开发,依赖于单分子阵列和同时计数单分子捕获微珠。这两种方法都能将检测能力的下限降低10倍或更多,与增强的模拟放大方法相比,但后者技术也易于与高通量自动化仪器兼容,用于ELISA试剂处理。通过使用大量微孔阵列,可以同时获取和查询数百到数万个数据点,实现快速数据采集和稳健统计。此外,从阵列中可能获得的快速数据采集可以应用于预编码具有不同荧光特性的多个微珠亚群,从而在单分子水平上实现高通量多重分析。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,常规试剂可轻松达到0.2pg!代理数字ELISA检测
芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个医学实验室都能用的单分子检测;IVD数字ELISA使用效果
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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
珠子以两种不同的方式读出。首先,在与100μMresorufin-阝-D孵育1小时后,用荧光板读出器以100μL方式读出珠子结合-半乳糖苷(RGP),一种荧光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板阅读器上,检测限为15fMofS阝G(图2)。其次,将珠子加载然后将RGP溶液密封到阵列的孔中,单个酶的信号被允许在反应室中积累,并每30秒获取一次荧光图像。实验结束时获取阵列的白光图像以识别含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光与空井不同)。荧光图像用于确定哪些微球具有相关的结合酶(从时间变化的荧光图像中强度增加)。图2显示了微球中含酶的比例与总体S阝G浓度的关系的对数-对数图。检测到的比较低酶偶联物浓度为350飞摩尔(zM),并通过外推信号等于的酶浓度计算得出的检测限(LOD)。 IVD数字ELISA使用效果
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