医学实验室数字ELISA超敏检测

时间:2025年01月09日 来源:

芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品

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8孔芯片+自动加样仪+自动扫描仪,实现8个样本或更多同时反应测试;自动加样仪:占地面积小,多功能用途,也可用来实验室自动加液;

适合的使用场景:突出主推产品:性能、客户案例、解决什么问题;优势:总反应时长30min、灵敏度高(可达到0.2pg/mL)CV好、(片内片间10%)操作方便稳定、微量样本测试2-6项指标:更小样本只10uL

使用更新的fg级超敏免疫检测simoa单分子产品原理;只强度变化的单个信号二维离散化、阵列单分散排布,形成数万个荧光信号;将传统的模拟信号转化为新型的数字化信号;创新型原理,有效提高检测灵敏度,可达fg/aM级! 芯弃疾单分子ELISA检测盒,使用灵活开放,少于8孔即可测试,可使用客户自研各用试剂!医学实验室数字ELISA超敏检测

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每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

从TNF-α数字ELISA测定的检测限为~150aM(2.5fg/mL),相当于全血中的~600aM(10fg/mL);市场上可用的ELISA对TNF-α的比较高灵敏度在血清中的LOD为21fM(0.34pg/mL)(补充图3)。两种方法的目标蛋白零浓度尖峰均为为这些实验提供有用的阴性对照:25%的血清含有多种蛋白质的微摩尔浓度,在这些高蛋白质背景之上可以检测到非常低浓度的目标蛋白。我们还开发了一个证明用于显示低浓度核酸可以检测到的DNA的主要数字分析方法,而无需复制目标


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动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。

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由于活性珠子的百分比接近50%(酶与微球的比例大于~1:1.5),然而,使用图像分析软件区分“开启”和“关闭”孔变得具有挑战性,我们达到了数字动态范围的实际上限。例如,图2中7fM(~45%活性)的信号偏离了线性。因此,这里使用50,000个孔展示的数字线性动态范围是从3.5fM到350zM,即大约四个对数单位。前提是蛋白质使用适当的酶浓度进行标记,这种动态范围对于许多临床应用来说是足够的 芯弃疾JX-8B单分子小型化ELISA检测产品,每个实验室都能用的单分子检测;

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8孔芯片,使用更灵活、低成本;移液枪手动操作,常规荧光显微镜检测,

低成本检测,用时更短(15min),试剂用量更低

超敏:芯弃疾.数字ELISA,与Simoa同样的检测方案,将检测结果二维化,使用成像方式,可精确量检测区多少个微球载体上发生免疫反应,具有阳性荧光信号,理论可达fg级;使用常规ELISA试剂,测试IL-6等演示指标,也可轻松达到亚pg级(0.2-0.5pg/mL)10微升样本,2-4项指标) 芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个实验室都能用的单分子检测;单分子免疫检测数字ELISA灵活

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单分子的检测原理:由Simoa数字免疫分析法实现的超灵敏度已在先前讨论过。简而言之,类似免疫分析中的酶-底物反应是在相对较大的反应体积(50-100µL)中进行的,在信号生成步骤中稀释了产物分子。信号分子的扩散和稀释将灵敏度限制在皮摩尔范围内。相比之下,Simoa通过将单独标记的免疫复合物和底物限制在飞升大小的孔中,从而限制了荧光产物分子从酶-底物反应中的扩散。当单一酶标签催化底物转化为荧光产物时,产生的荧光团被限制在孔中,从而在短时间内产生可测量的荧光信号。医学实验室数字ELISA超敏检测

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