国内病毒二代测序突变分析原理

目前对我国首例输入性裂谷热病例病毒进行全基因组测定,分析其进化来源及潜在变异.方法提取样本核酸,非特异性反转录扩增病毒基因组RNA,使用IonTorrent二代测序仪进行病毒全基因组测定.对获得的基因组数据进行序列拼接、比对、进化树构建和关键位点分析.结果通过测定获得了病毒全基因组11979nt,该测定病毒属E基因分支,序列与先前南非分离株Kakamas相似度较高(＞98％)。病毒Gn蛋白C端信号肽区存在1个氨基酸突变.结论本研究分析测定的裂谷热病毒全基因组与目前非洲流行株高度相似,病毒基因特征未出现明显变异。对病毒全基因组进行测序，是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列.国内病毒二代测序突变分析原理

病毒基因组测序的五条标准是：测序的完成程度，决定着基因组的下游应用，包括设计诊断产品、反向遗传系统以及开发调整对策等。基因组是生物体内的遗传物质，以DNA或RNA的形式编码。病毒基因组包括基因和一些非编码的DNA或RNA序列，含有病毒复制和传播所必需的信息。因此，确定这些序列可以获得宝贵的信息，可以应用于各种医学和科研领域。高通量测序技术飞速发展，现在几乎所有的病毒研究方向都涉及了测序，包括分子流行病学、药物和疫苗开发、病毒的监控与诊断等等。国内病毒全基因组测序进化分析方法高通量测序技术正式启用之后，研究者可以将样品处理至标准浓度和体积后进行测序和分析.

病毒基因组测序包括完成图测序、扫描图测序和重测序三个层面，通过二代/三代测序平台，获得病毒的基因组的序列信息，并在结构基因组学、比较基因组学层面通过差异分析、同源基因分析、共线性分析、物种进化分析等手段探究病毒的毒力系统、基因组的进化与演变历程等。对疑似传染标本采集提取后直接进行高通量测序，通过病原微生物数据库比对和智能化算法分析，获得疑似致病微生物种属信息，并提供全方面深入的报告，为疑难危重传染提供快速准确诊断依据，促进药物的合理应用。

高通量测序在病毒准种研究中如何应用在采用高通量测序技术研究准种耐药性方面，人类免疫缺陷病毒(HIV)较为突出。人类免疫缺陷病毒的逆转录酶有非常大的错配倾向，造成几乎每复制1轮出现1个碱基对替换突变。被侵染的个体中存在非常巨大的病毒群，每天有1010个病毒粒子产生和死亡，在侵染后这种行为导致病毒快速形成一个多样性的群，即准种。高通量测序是研究大群体中序列突变体特征的先进方法，它的一种应用是对个体抗病毒治疗失败时产生的数量很少的耐药突变的定量研究。探普生物对于样本准备独特的处理方法指南为后续的分析结果打下了牢固的基础。

在探普生物长时间运行过程中，我们接触到的对病毒的全基因组进行测序项目有比较丰富的应用场景。先，从事基因进化/疫苗/药品/抗体研制方向的研究的研究者一定会用到测序。这种场景一般是用密集的sanger测序监测某几个关键基因，搭载一定频率的全基因组测序。这样的组合省时省力省经费，同时能达到研究目的。此外，有的单位需要对传染病的病原进行流行病学监测和研究，如疾控/疫控中心、医院的传染病科室以及一些高校和研究所的相应课题组，可能需要对病毒的全基因组进行测序以后，结合其他上下游的研究数据，达到研究或者监测疫病的目的。病毒全基因组测序具有的特点:独有的一定定量技术,实现病原定量分析。国内病毒二代测序突变分析原理

对病毒全基因组进行测序,是利用生物信息分析手段,得到病毒的全基因组序列。国内病毒二代测序突变分析原理

病毒（Virus）由一种核酸分子（DNA或RNA）与蛋白质（Protein）构成或由蛋白质构成（如朊病毒）。根据遗传物质的组成，可分为单链DNA病毒（ssDNA）、双链DNA病毒（dsDNA）、单链RNA病毒（ssRNA）、双链RNA病毒（dsRNA）和蛋白质病毒（如朊病毒）。根据宿主类型的不同，可以分为噬菌体（细菌病毒）、植物病毒（烟花叶病毒）和动物病毒（如禽流感病毒、天花病毒和HIV等）。病毒全基因组测序（VirusWholeGenomeSequencing，VWGS），是指基于第二代高通量测序技术，对病毒全基因组进行测序，利用生物信息分析手段，得到病毒的全基因组序列，解析编码信息，并获得相应的变异信息。国内病毒二代测序突变分析原理