NAC预装培养皿
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下:1.**准备工作**:-确保实验室无菌操作条件,穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**:-按照培养基包装上的说明,称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中,通常为100mL。-将混合物加热至沸腾,以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**:-将溶解好的培养基冷却至50℃左右(避免过热,以免杀死细菌),此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中,一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固,形成固体培养基平板。4.**接种样品**:-使用无菌操作,将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**:-将接种后的平板倒置,放入恒温培养箱中。-根据实验要求,通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**:-培养结束后,观察平板上的生长情况,记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落,如蓝绿色或黄色菌落,这些可能是目标弧菌。
营养琼脂方瓶(罗氏瓶)通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式,适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基,用于非苛养微生物的培养,以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方:1.**成分**:-蛋白胨:10.0g/L-牛肉膏粉:3.0g/L-氯化钠:5.0g/L-琼脂:15.0g/L-终pH值:7.3±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取33g营养琼脂培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶(罗氏瓶)中,通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**:-灭菌完成后,取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集,可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下,将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后,可将培养皿放置在热空气烤箱中,用较低温度烘烤几分钟,以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**:-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间,容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。甘露醇盐琼脂预装培养皿通过接种质控菌株,如大肠埃希氏菌、普通变形杆菌和鼠伤寒沙门氏菌等,培养后观察菌落生长。
弯曲杆菌琼脂基础是一种专门用于分离和培养弯曲杆菌属(Campylobacter)细菌的培养基,尤其是空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)和大肠弯曲杆菌(Campylobactercoli)。以下是它的一些主要特点:1.**选择性培养**:弯曲杆菌琼脂基础通常与特定的选择性添加剂一起使用,如改良Karmali选择性添加剂或弯曲杆菌选择性添加剂,这些添加剂含有抗生物质,如万古霉素和两性霉素B,以抑制其他非目标微生物的生长,提高目标弯曲杆菌的分离率。2.**无血培养基**:某些类型的弯曲杆菌琼脂基础是无血的,这使得它在某些应用中比需要添加血液的培养基更为方便和经济。无血培养基通常使用活性炭、硫酸亚铁和酸钠替代血液。3.**微需氧环境**:弯曲杆菌是微需氧菌,生长环境是含氧气5%、二氧化碳10%、氮气85%。因此,弯曲杆菌琼脂基础通常在微需氧条件下使用,这有助于弯曲杆菌的生长。4.**菌落特征**:在适宜的条件下,空肠弯曲杆菌在弯曲杆菌琼脂基础中生长,形成灰色、湿润、平铺的菌落,这些特征有助于识别弯曲杆菌。5.配方:弯曲杆菌琼脂基础的配方可能包含蛋白胨、酵母浸粉、胰酪蛋白胨、氯化钠、琼脂等,提供碳、氮源、维生素和生长因子。
TGE肉汤(TryptoneGlucoseExtractBroth),又名胰蛋白胨葡萄糖提取物肉汤,是一种用于微生物培养的液体培养基。这种培养基通常含有胰蛋白胨、牛肉浸粉和葡萄糖,以及作为指示剂的TTC(三苯基四氮唑氯化物)。TGE肉汤(含TTC)的主要用途和特点如下:1.**用途**:TGE肉汤主要用于水、牛奶和乳制品中异养细菌的计数。它适用于细菌总数的测定,也可用于检测乳品中的耐热细菌。2.**成分**:典型的TGE肉汤配方包含胰蛋白胨、牛肉浸粉、葡萄糖和TTC。胰蛋白胨和牛肉浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子,葡萄糖作为可发酵的糖类提供能量。3.**pH值**:TGE肉汤的pH值通常调节在7.0±0.2(25℃)。4.**制备方法**:将TGE肉汤的干粉溶解在蒸馏水中,加热煮沸以帮助成分溶解,然后进行高压灭菌。5.**使用**:通常取一定量的培养基加热溶解于蒸馏水中,分装后进行高压灭菌,然后用于微生物的培养。6.**指示剂**:TTC作为指示剂,当细菌代谢时,TTC会被还原成红色的三苯基甲烷,从而便于观察细菌的生长情况。7.**保存条件**:未开封的TGE肉汤通常在室温下避光保存,开封后应旋紧瓶盖,避免吸潮结块,并根据存放条件适当延长保存期。
轻唾琼脂培养基(MSA)基础,也称为轻型唾液链球菌琼脂培养基基础,是一种用于分离培养轻型链球菌(绿色链球菌)、唾液链球菌(非溶血性链球菌)和肠球菌的选择性培养基。以下是它的一些特点:1.**成分**:该培养基的配方中含有胰酪蛋白胨、牛肉粉、磷酸氢二钾、葡萄糖、蔗糖、台盼蓝、结晶紫和琼脂等。其中,胰酪蛋白胨和牛肉粉提供氮源和碳源,蔗糖作为可发酵的碳水化合物来源,磷酸氢二钾作为缓冲剂,台盼蓝和结晶紫作为染料提供菌落颜色,琼脂作为凝固剂。2.**pH值**:培养基的pH值通常控制在7.0±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:通过添加结晶紫和亚碲酸钾,该培养基可以抑制大多数革兰氏阴性杆菌和大多数革兰氏阳性细菌的生长,而对链球菌和肠球菌的生长影响较小。4.**应用**:轻唾琼脂培养基基础主要用于轻型链球菌、唾液链球菌和肠球菌的分离培养,这些细菌在培养基上可以形成具有特征颜色的菌落,有助于后续的鉴定和分析。5.**配制方法**:通常称取90g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水或去离子水中,加热煮沸至完全溶解,分装后进行高压灭菌。灭菌结束后,冷却至50-55℃,加入无菌1%亚碲酸钾溶液,混匀后倒入无菌培养皿中。CVT琼脂含有胰酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、结晶紫、TTC(2,3,5-三苯基氯化四氮唑)和琼脂等成分。燕麦琼脂预装培养皿
GAM肉汤培养基广泛应用于菌种的生长、保存和实验操作。它支持多种微生物的生长,并在菌种冷冻保存中。NAC预装培养皿
PK琼脂培养基,也称为Pikovskaya'sAgar,是一种用于检测解磷微生物(phosphatesolubilizingmicroorganisms)的培养基。这种培养基的原理基于解磷微生物在生长过程中能够将不溶性的磷酸盐转化为可溶性形式,从而使得培养基中的磷酸钙溶解,导致培养基的透明度发生变化。**配方组成**:-酵母提取物:0.5g-D-葡萄糖:10.0g-磷酸钙:5.0g-硫酸铵:0.5g-氯化钾:0.2g-硫酸镁:0.1g-硫酸锰:0.0001g-硫酸亚铁:0.0001g-琼脂:15.0g**配制方法**:1.使用1000ml蒸馏水重悬31.3g培养基。2.不断搅动并加热,煮沸1分钟使培养基完全溶解。3.121°C高压蒸汽灭菌15分钟。4.冷却至50°C时,分装15ml培养基到每个无菌培养皿中。**培养条件**:-通常在35°C下培养48小时。**观察指标**:-在PK琼脂培养基上生长的解磷微生物菌落周围的培养基由不透明变透明,通过观察培养基的透明度变化来判断微生物是否具有解磷能力。**保存条件**:-密封,2-30°C避光保存。**注意事项**:-避免吸入和皮肤接触。这种培养基在土壤微生物学、植物病理学和环境微生物学等领域有着广泛的应用,特别是在研究植物-微生物相互作用以及微生物对土壤养分循环的贡献方面。NAC预装培养皿
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