V-P半固体琼脂(VP)
LG培养基(LindenGrainMedium)是一种用于微生物检测的培养基,其特点和用途如下:1.**用途**:LG培养基主要用于霉菌、酵母菌、耐热霉菌及细菌总数的检测,也可用于PET瓶及无菌罐装生产线的无菌验证。2.**成分**:LG培养基的主要成分包括胰蛋白胨、葡萄糖、酵母浸粉、硫酸铵、磷酸二氢钾和硫酸镁。3.**实验原理**:在LG培养基中,胨提供碳源和氮源;酵母浸出粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;磷酸氢二钾作为缓冲剂;硫酸镁提供必需的微量元素;硫酸铵可维持均衡的渗透压及利于目标菌的生长。4.**pH值**:培养基的pH值通常控制在6.5-6.8之间。5.**制备方法**:称取29.5g的LG培养基,加入1L的蒸馏水或去离子水中,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装试管或三角瓶,121℃灭菌15分钟。注意,培养基中含少量硫酸镁,灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**:接种质控菌株后,放置36±1℃需氧培养18-24小时,菌于28~32℃培养3-5天。例如,金黄色葡萄球菌ATCC6538、铜绿假单胞菌ATCC9027、枯草芽孢杆菌ATCC6633、白色念珠菌CMCC98001、酵母菌CMCC98007和黑曲霉菌CMCC98003在该培养基上应有良好的生长情况。TSI 培养基可根据细菌的不同反应,有效筛查出具有特殊生化特性的肠道杆菌。V-P半固体琼脂(VP)
培养基
BPY琼脂培养基(BeefPrptoneYeastmedium,BPY)是一种富营养培养基,常用于菌的培养。它也适用于异养型微生物的分离培养。这种培养基的主要成分包括蛋白胨、酵母膏粉、牛肉粉、葡萄糖和琼脂,其中蛋白胨、酵母膏粉和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子;葡萄糖作为碳源,琼脂作为凝固剂。**特点**:1.**营养成分丰富**:提供足够的营养以支持微生物的生长和繁殖。2.**pH稳定**:通常控制在7.0至7.2之间,适宜大多数微生物生长。3.**凝固性好**:含有适量的琼脂,便于制成固体培养基,便于微生物的分离和计数。**制备方法**:1.称取适量培养基,加蒸馏水至1L,搅拌均匀。2.调pH值至7.2±0.2。3.121℃高温灭菌15分钟或115℃高温灭菌20分钟。4.冷却到50-60℃,混匀后倾倒平皿,4℃避光保存,备用。**注意事项**:1.注意无菌操作,避免微生物污染。2.根据菌株生长特性,可适当调整pH值。3.该培养基用于科研领域,不宜用于临床诊断或其它用途。4.称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。肝浸液培养基TSI 培养基可快速鉴别肠道菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖的发酵利用情况,是细菌鉴定的得力助手。
营养肉汤(NutrientBroth,简称NB)是一种常用的细菌培养基,它的定义、应用和制备方法如下:1.**定义**:营养肉汤,也被称为普通肉汤,是一种用于细菌类疫苗检验的培养基,如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**:营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子,同时也提供碳源;氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**:营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2(25℃)。4.**制备方法**:-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml,混合后微热溶解,然后调整pH值至7.4-7.6,滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液,pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是:蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中,搅拌均匀后,使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2,然后分装至三角瓶或试管中,121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**:营养肉汤用于细菌的培养,尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长,但不适用于苛养型微生物。
放线菌肉汤(ActinomycesBroth)是一种用于培养厌氧型放线菌的非选择性培养基。它的特点是能够为放线菌提供适宜的生长环境,促进其生长和繁殖。以下是放线菌肉汤的一些特点:1.**成分**:放线菌肉汤的配方包含多种营养成分,如胰蛋白胨、心浸液肉汤、磷酸二氢钾、硫酸镁、氯化钙、葡萄糖、L-半胱氨酸盐酸盐、酵母提取物和可溶性淀粉等,这些成分有助于提供碳源、氮源和必要的维生素及矿物质。2.**外观**:配制后的放线菌肉汤呈琥珀色透明溶液,具有麦秸色均一粉末的外观。3.**pH值**:放线菌肉汤的pH值通常控制在6.9±0.2,以适应放线菌的生长需求。4.**灭菌**:培养基在配制后需要进行灭菌处理,通常采用121℃高温蒸汽灭菌15分钟。5.**应用**:放线菌肉汤适用于传代、培养厌氧型放线菌菌种,如链霉菌等。6.**保存条件**:灭菌后的培养基应密封并在2-25°C的条件下保存。7.**注意事项**:使用时需要注意避免摄入、吸入、皮肤接触,以确保安全。8.**培养效果**:放线菌在放线菌肉汤中生长良好,可以形成典型的菌落,便于观察和研究。这种培养基的设计是为了满足放线菌生长的特定条件,因此在微生物学研究和工业生产中有着广泛的应用。其含有酚磺酞指示剂,可根据颜色变化清晰指示细菌发酵糖类产生的酸碱性变化,便于观察。
Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂,以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子,牛胆粉提供维生素和其他营养物质,葡萄糖提供碳源,结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂,琼脂作为凝固剂。**配制方法**:1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时,加入过滤除菌的链霉素水溶液(3mg/ml)10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**:-对于黑曲霉CMCC(B)98003和酿酒酵母菌ATCC9763,其生长率(PR)应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922,其生长应≤1(G≤1)。**储存条件**:应贮存于避光、干燥处,未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果,同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用,从而更有利于菌的选择性生长。LB琼脂可以通过将粉末成分溶解在去离子水中,加热煮沸以帮助琼脂溶解,然后用NaOH调节pH至适宜值。营养琼脂(NA)
TSI培养基广泛应用于微生物实验室,用于细菌的鉴定和分类。可以对细菌进行初步的生化鉴定 。V-P半固体琼脂(VP)
麦氏(Meclary)琼脂是一种用于菌培养的培养基,其特点包括:1.**配方**:包含酵母浸粉、葡萄糖、氯化钾、醋酸钠和琼脂等成分,pH值控制在6.4±0.2(25℃),为菌提供适宜的生长环境。2.**配制方法**:称取28.5克麦氏琼脂培养基干粉,加入1升蒸馏水或去离子水,加热煮沸至完全溶解,分装后进行115℃高压灭菌30分钟,备用。3.**用途**:适用于菌培养,特别用于某些霉菌和酵母菌的分离和培养。4.**pH值**:pH值对菌的生长至关重要,麦氏琼脂的pH值适应了某些菌对生长环境的酸碱度要求。5.**选择性**:可能具有一定的选择性,有助于特定类型菌的生长,同时抑制或限制其他微生物的生长。6.**应用**:它常用于实验室中菌的分离、鉴定和计数。通过麦氏琼脂培养基进行菌的分离与鉴定通常包括以下步骤:1.**样品收集**:从疑似有菌存在的环境或物体表面采集样本。2.**样品处理**:将采集的样本进行适当的预处理,如稀释、均质化等。3.**接种**:将处理过的样品接种到麦氏琼脂培养基上。4.**培养**:将接种后的培养基放入恒温培养箱中进行培养,一般温度控制在25℃左右。5.**观察**:在培养过程中定期观察,记录菌落的生长情况、形态特征等。V-P半固体琼脂(VP)