西藏HE染色

HE染色攻略：HE染色又称为苏木精-伊红染色，染色后组织或细胞可以借助普通光学显微镜观察与鉴别细胞凋亡与细胞坏死的一种染色方法。这种方法适用范围***，对组织细胞的各种成分都可着色，便于***观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色，细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。可以观察细胞结构、组织层次等等。首先切片组织是否完整，组织有无损伤；然后看切片有无刀痕；***细胞核是否清晰可见，胞核与包浆要对比鲜明。HE染色取材和样本保存方式。西藏HE染色

HE染色细胞浆染色原理：细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色，现时胞核也被染色，核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被***成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。海南推荐的HE染色海马组织HE染色如何观察。

HE染色反蓝的原理：苏木素染液，细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA）,DNA的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木素精碱性染料以离子或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。 分化：苏木素染色之后，用水洗去未结合在细胞上的染液，但是在细胞核中结合过多的染料和细胞浆中吸附的染料必须用分化液1%盐酸酒精脱去，才能保证细胞核和细胞浆染色的分明，把这个过程称为染色的分化作用。因酸能破坏苏木素的醌型结构，使色素与组织解离，分化不可过度。蓝化：分化之后苏木素在酸性条件下处于红色离子状态，在碱性条件下处于蓝色离子状态，而呈蓝色，所以分化之后用水洗去酸而中止分化，再用弱碱性水使苏木精染上的细胞核变呈蓝色，称蓝化作用，一般多用自来水浸洗即可变蓝，也可用温水（50度温水比较好）变蓝。

HE染色常见问题：成片的染色模糊不清，灰染答：（1）组织未及时固定，部分自溶；或固定不佳，深部组织未处理到。这种只能重新固定了。（2）尽管乙醇也是一种固定液，但尽量少用或不用，因为其会导致组织发硬变脆，染色效果不好。（3）包埋时蜡的温度过高，或切片后烤片时间和温度过久过高都不好，可能会导致无法染色。（4）脱蜡不彻底；染料有问题；分化过度导致的颜色变淡，镜下组织界限不清；染完后的脱水和透明不佳，水雾残留在组织上。（5）通风窗中（防止空气中的水雾），戴口罩操作封片（减少哈气带来的水雾）。HE染色规范化流程以及注意事项。

HE染色切片中出现类似色素样的点状结晶和黑色光滑的细胞核原因：切片封片前放置在空气中时间太长，以至于二甲苯挥发切片干燥所致。对策：移去组织切片上的盖玻片和封固剂，重新处理。将切片水洗数分钟，然后重新脱水、透明、封固。封片过程中要保持组织切片的轻度湿润，尽量不要让其干燥。细胞核呈红、棕色改变原因：苏木精染色液过度氧化和切片在苏木精染液染色后返蓝不足。对策：首先，每次染色之前检查苏木精染色液的染色能力，发现氧化过度应及时更换。其次，可用流水、温水或弱碱性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氢钠等，在苏木精染色后，给切片以足够的蓝化时间。HE染色，南京英瀚斯，专业的实验外包公司。西藏HE染色外包

冰冻切片是否可以做HE染色？西藏HE染色

HE染色常见问题：切片染色不均匀，有片状的弱着**存在答：（1）取材时组织太厚，固定过久，导致深部组织固定不佳，而表浅组织过度固定，而透明、脱水、浸蜡均是如此，这样在后期染色时就会出现染色不均匀。应该将厚的组织剖开固定。（2）制片过程有问题，切片厚薄不一，或者有刀痕，或组织与玻片间存在气泡。同一张切片厚薄不一，一般都是在制片时，刀片固定不佳或刀片钝或刀片与组织角度不佳（一般比较好角度为5°）（3）脱蜡前未烘烤，脱蜡时间过短或脱蜡液使用过久，导致脱蜡不彻底。（4）染色液过少，着色不均匀；或染色时部分组织干涸而另一部分湿润，这样会导致组织吸附染料的能力不一。（5）分化不当。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。西藏HE染色