MB培养基基础

营养肉汤（NutrientBroth，简称NB）是一种常用的细菌培养基，它的定义、应用和制备方法如下：1.**定义**：营养肉汤，也被称为普通肉汤，是一种用于细菌类疫苗检验的培养基，如作为疫苗杂菌计数的稀释液。2.**成分**：营养肉汤的主要成分包括蛋白胨、牛肉膏、氯化钠和水。蛋白胨和牛肉膏提供氮源、B族维生素、氨基酸和其他生长因子，同时也提供碳源；氯化钠用于维持培养基的渗透压。3.**pH值**：营养肉汤的pH值通常控制在7.2±0.2（25℃）。4.**制备方法**：-将蛋白胨10g、氯化钠5.0g和牛肉汤加入至1000ml，混合后微热溶解，然后调整pH值至7.4-7.6，滤清后分装并在116℃下灭菌30分钟。灭菌后的营养肉汤应该是淡黄色透明无沉淀的溶液，pH值应为7.2-7.4。-另一种配方是：蛋白胨10.0g、牛肉浸出粉3.0g、氯化钠5.0g和蒸馏水1000ml。将上述成分溶解在蒸馏水中，搅拌均匀后，使用NaOH或HCl调节pH至7.2±0.2，然后分装至三角瓶或试管中，121℃高压灭菌15分钟。5.**应用**：营养肉汤用于细菌的培养，尤其是那些需要丰富营养才能良好生长的细菌。它适合营养需求较高的细菌的生长，但不适用于苛养型微生物。TSI 培养基通过细菌在其中的生化反应表现，助力准确区分肠杆菌科的各菌属。MB培养基基础

脑心浸出液肉汤（BrainHeartInfusionBroth，简称BHI）是一种使用的微生物培养基，其特点如下：1.**营养丰富**：BHI培养基含有牛心浸粉、胰蛋白胨、葡萄糖、氯化钠和磷酸氢二钠等成分，为多种微生物提供碳源、氮源、维生素和生长因子。这种培养基特别适合培养苛养型致病微生物，如链球菌、脑膜炎球菌、肺炎球菌等。2.**pH稳定**：BHI培养基的pH值通常控制在7.4±0.2（25℃），这为微生物的生长提供了适宜的酸碱环境。3.**非选择性**：BHI培养基是非选择性的，意味着它能够支持细菌、霉菌和酵母菌等多种微生物的生长。4.**应用广**：BHI培养基可用于从临床标本中进行需氧细菌的初步分离，也可用于培养单增李斯特菌、葡萄球菌等，以及进行血浆凝固酶试验和药敏实验。5.**制备方法**：将BHI培养基的干粉加入到蒸馏水中，加热煮沸以完全溶解，然后在121°C条件下高压蒸汽灭菌15分钟。6.**储存条件**：BHI培养基通常在避光、干燥的条件下保存，未开封的保质期可达三年。7.**质量控制**：使用特定的质控菌株进行生长测试，确保培养基的质量符合标准，如粪肠球菌ATCC29212、金黄色葡萄球菌ATCC6538等。黄原胶液体发酵培养基（蔗糖）LB琼脂主要由胰蛋白胨（10g/L）、酵母提取物（5g/L）、氯化钠（10g/L）和琼脂（15-20g/L）组成。

CAS培养基，也称为ChromeAzurolS（CAS）检测培养基，主要用于检测微生物是否产生铁载体（siderophore）。铁载体是一类能特异性结合铁离子并供给微生物细胞的低分子量物质，对于微生物在缺铁环境中的生长至关重要。CAS培养基的特点主要包括：1.**成分**：CAS培养基包含铬天青S（CAS）、十六烷基三甲基溴化铵（HDTMA）、铁离子等成分，这些成分与微生物分泌的铁载体反应，产生颜色变化，从而可以判断微生物是否产生铁载体。此外，培养基中还包含葡萄糖、蛋白胨、硫酸镁、氯化钙等，提供微生物生长所需的碳源、氮源和其他生长因子。2.**颜色变化**：当微生物产生的铁载体与CAS培养基中的复合物结合后，会夺走铁离子，使培养基颜色由蓝色变为橘黄色，出现铁载体分泌圈，这有助于判断细菌是否产生铁载体。3.**pH值**：CAS培养基的pH值通常控制在6.8±0.1（25℃），以保证微生物的生长和铁载体的活性。4.**配制方法**：CAS培养基的配制方法相对复杂，但一些产品如Coolaber改良的CAS琼脂培养基已经进行了改良，减少了实验准备时间。该产品分为培养基基础、已灭菌的缓冲剂和已灭菌的CAS检测液三个部分，使用时只需将这些组分按说明混合即可。

尿素培养基是一种用于检测细菌是否具有尿素酶活性的微生物培养基。其特点主要包括：1.**成分**：尿素培养基的主要成分包括蛋白胨、氯化钠、磷酸二氢钾、尿素、葡萄糖、酚红指示剂和琼脂等。蛋白胨提供碳源和氮源；氯化钠维持均衡的渗透压；磷酸二氢钾作为缓冲剂；尿素作为底物检测细菌是否具有尿素酶活性；酚红作为pH指示剂，琼脂作为凝固剂。2.**pH值**：培养基的pH值通常控制在7.2±0.2（25℃），以保证微生物的生长环境和酶活性的发挥。3.**尿素酶检测**：某些细菌能产生尿素酶，将尿素分解产生氨，使培养基变为碱性，酚红指示剂在pH升高时变色（通常为粉红色），通过观察颜色变化来判断细菌是否具有尿素酶活性。4.**配制方法**：将除尿素和琼脂以外的成分配好，并校正pH，加入琼脂，加热溶化并分装。高压灭菌后，冷至50～55℃，加入经除菌过滤的尿素溶液，pH应为7.2±0.1。分装于灭菌试管内，放成斜面备用。5.**应用**：尿素培养基主要用于鉴定革兰氏阴性菌中的尿素酶活性，如用于肠杆菌科细菌的鉴定，例如大肠埃希菌和奇异变形杆菌等细菌具有尿素酶活性，而鲍曼不动杆菌则不具备尿素酶活性。TSI 培养基成分明确，有助于准确分析细菌的生化反应，是一种可靠的细菌鉴别培养基。

肠球菌肉汤（EnterococcusBroth）是一种专门用于增菌培养肠球菌的微生物培养基。它的特点和应用如下：1.**成分**：肠球菌肉汤的主要成分包括胰蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、牛胆粉、氯化钠、柠檬酸钠、七叶苷、柠檬酸铁铵和叠氮化钠等。这些成分为肠球菌提供氮源、维生素和生长因子，同时维持适宜的渗透压和提供选择性抑制其他非目标菌种的环境。2.**选择性**：牛胆粉和叠氮化钠作为选择性抑菌剂，有助于抑制非链球菌的细菌生长，特别是对革兰氏阴性细菌有抑制作用。3.**应用**：该培养基主要用于食品和水中肠球菌的鉴别培养，如GB/T5750.12-2023生活饮用水标准中提到的应用。4.**制备方法**：通常将肠球菌肉汤的粉末配方溶解在蒸馏水中，加热煮沸至完全溶解，然后进行高压灭菌，以确保无菌。5.**质量控制**：在36±0.5℃培养24小时后，可以观察到特定菌株的生长情况。例如，粪链球菌（CMCC(B)32223）在肠球菌肉汤中生长良好，呈现棕黑色，并具有棕色晕轮，而金黄色葡萄球菌（ATCC6538）和大肠埃希氏菌（ATCC25922）则被抑制，不生长或生长很差。对于微生物的生化反应筛选，TSI 培养基具有较高的特异性和敏感性，结果准确可靠。RV沙氏增菌肉汤

克氏双糖铁琼脂（KI）培养基是一种用于微生物学检验的培养基，用于革兰阴性杆菌，如肠杆菌科细菌的鉴别。MB培养基基础

Littman琼脂是一种常用于菌分离培养的培养基。其基本成分包括蛋白胨、牛胆粉、葡萄糖、结晶紫和琼脂，以及具有中性pH值7.0±0.2。蛋白胨提供氮源和生长因子，牛胆粉提供维生素和其他营养物质，葡萄糖提供碳源，结晶紫作为抑制革兰氏阳性菌的生长抑制剂，琼脂作为凝固剂。**配制方法**：1.称取50克Littman琼脂干粉。2.加入1升蒸馏水或去离子水。3.搅拌加热煮沸至完全溶解。4.进行121℃高压灭菌15分钟。5.冷却至50℃左右时，加入过滤除菌的链霉素水溶液（3mg/ml）10ml。6.混匀后倾入无菌平皿。**质量控制**：-对于黑曲霉CMCC（B）98003和酿酒酵母菌ATCC9763，其生长率（PR）应≥0.7。-对于金黄色葡萄球菌ATCC6538和大肠埃希氏菌ATCC25922，其生长应≤1（G≤1）。**储存条件**：应贮存于避光、干燥处，未开封的保质期为三年。Littman琼脂对于菌的分离培养具有良好的效果，同时通过添加链霉素可以增强对细菌生长的抑制作用，从而更有利于菌的选择性生长。MB培养基基础