改良NBB琼脂平板
牛津琼脂(OXA)基础的pH值对李斯特氏菌的生长有影响。李斯特氏菌的适生长pH值为7.0±0.2(25℃),这与牛津琼脂(OXA)基础的pH值相匹配。在这个pH值下,李斯特氏菌能够良好地生长并表现出其特有的生物学特性,如β-溶血和七叶苷的水解。pH值对微生物生长至关重要,因为它可以影响:1.**酶活性**:许多微生物的代谢酶在特定的pH值范围内活性高。2.**细胞膜功能**:pH值的变化可能会干扰细胞膜的完整性和功能,影响营养物质的吸收和废物的排出。3.**代谢途径**:pH值的变化可能会改变微生物的代谢途径,从而影响其生长和繁殖。牛津琼脂(OXA)基础中的pH值是通过添加特殊蛋白胨和可溶性淀粉等成分来维持的,这些成分不仅提供碳氮源、维生素和生长因子,还有助于维持培养基的pH值。如果pH值偏离了范围,可能会抑制李斯特氏菌的生长,或者导致其他非目标微生物过度生长,影响结果的准确性。因此,为了确保牛津琼脂(OXA)基础能够准确地分离和培养李斯特氏菌,实验室人员需要仔细控制和监测培养基的pH值。低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。改良NBB琼脂平板
肉浸液肉汤是一种基础的微生物培养基,其主要特点和制作方法如下:1.**成分**:肉浸液肉汤主要由绞碎牛肉、氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾组成,再加上一定量的蒸馏水。具体配比为:绞碎牛肉500g、氯化钠5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水1000mL。2.**制作方法**:首先将绞碎的去筋膜无油脂牛肉与蒸馏水混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量。然后加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH至7.4~7.6,煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30分钟。3.**用途**:肉浸液肉汤通常用于培养那些营养要求不是特别高的细菌,如溶血性链球菌及其他营养要求较高的细菌的增菌培养(GB/T4789.28-2003中4.1G)。它提供了细菌生长所需的氮源、维生素和生长因子。4.**培养特征**:在肉浸液肉汤中,细菌可以很好地生长,通常表现为肉汤混浊,这是由于细菌的代谢活动导致的。5.**储存**:肉浸液肉汤的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处,开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。甘露醇发酵预装培养皿普通肉汤培养基通常由蛋白胨、牛肉浸粉(或牛肉膏粉)、氯化钠和水组成,这些成分为细菌提供必需的碳源等。
乙基紫叠氮钠肉汤(EthylVioletAzideBroth,EVA)是一种用于微生物培养的选择性培养基,特别适合于链球菌的增菌培养。以下是它的一些特点和用法:**特点**:1.**成分**:含有酪蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、氯化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、叠氮钠和乙基紫等成分。2.**pH值**:pH值控制在7.0±0.2(25℃),为细菌提供适宜的生长环境。3.**选择性**:叠氮钠可以抑制革兰氏阴性细菌的生长,特别是对变形杆菌的抑制效果好。4.**应用**:主要用于链球菌的增菌培养,也可用于其他需氧菌和兼性厌氧菌的培养。**配制方法**:1.称取35.8g培养基粉末,加入1000mL蒸馏水。2.加热搅拌至完全溶解。3.分装后,在121℃高压下灭菌15分钟。**质量控制**:-制备好的培养基应进行pH值、无菌性检查和适用性检查。-培养基的保存应避光、密封,并在已验证的条件下贮藏。**应用**:-用于链球菌的分离培养,通过观察菌落的生长情况和特征进行鉴定。**注意事项**:-在配制和操作过程中,应避免摄入、吸入、皮肤接触,并在通风橱中进行,佩戴适当的个人防护装备。
酪蛋白琼脂是一种专门用于微生物学研究的培养基,尤其适用于蜡样芽孢杆菌的酪蛋白分解试验。以下是它的一些主要特点:1.**成分**:酪蛋白琼脂的基础成分包括酪蛋白、牛肉浸粉、氯化钠、磷酸氢二钾、琼脂和溴百里香酚兰。其中,酪蛋白作为主要的氮源和蛋白分解能力的指示剂,牛肉浸粉提供额外的氮源和维生素,氯化钠维持渗透压平衡,磷酸氢二钾作为缓冲剂,琼脂作为凝固剂,溴百里香酚兰作为pH指示剂。2.**pH值**:该培养基的pH值通常调节在7.4±0.1(25℃),以保证细菌在比较好pH环境下生长。3.**灭菌处理**:制备好的培养基需要进行121℃高压灭菌15分钟,以确保无菌。4.**使用方法**:称取一定量的培养基粉末,加入到1升蒸馏水中,加热至完全溶解,然后进行灭菌处理。冷却至适当温度后倒入培养皿中,待凝固后用于微生物的培养。5.**培养特征**:在酪蛋白琼脂上,蜡样芽孢杆菌能产生酪蛋白酶,分解酪蛋白,使菌落周围的培养基形成透明圈。这种透明圈的形成是鉴定蜡样芽孢杆菌的重要依据。同时,溴百里香酚兰的颜色变化(由绿变蓝)也有助于观察结果。6.**质量控制**:通过接种质控菌株并观察培养特征来验证培养基的质量。TSFA主要用于乳制品中嗜冷菌菌落总数和需氧芽孢总数的测定,对于确保乳制品的质量和安全至关重要 。
Leeming-Notman培养基(LN培养基)是一种用于培养马拉色菌属(Malassezia)的培养基。该培养基的配方包含多种营养成分,能够促进马拉色菌的生长。以下是Leeming-Notman培养基的一些关键特点和配制方法:1.**配方组成**:-蛋白胨(Bacteriologicalpeptone):10.0g-葡萄糖(Glucose):10.0g-酵母膏粉(Yeastextract):2.0g-牛胆盐(Oxbile,desiccated):8.0g-单硬脂酸甘油酯(Glycerolmonostearate):0.5g-吐温60(Tween60):5.0mL-橄榄油(Oliveoil):20mL-琼脂(Agar):15g-去离子水(Deionizedwater):1.0L-pH值调整至5.6±0.2(25℃)2.**配制方法**:-称取培养基粉末,加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至指定范围。-进行高压灭菌,通常是121℃灭菌15分钟。-冷却至50-55℃后,无菌加入添加剂。3.**用途**:-主要用于培养马拉色菌属的菌,这些菌与人类皮肤有共生关系,并且在医学研究中具有重要意义。4.**保存条件**:-通常在2-8°C下保存,保质期通常为两年。5.**注意事项**:-避免吸入和皮肤接触。-配制过程中应在无菌条件下操作。
巴氏芽孢杆菌的芽孢形成需要特定的培养条件,包括营养和环境因素。例如,使用改良的Schaeffer培养基。改良NBB琼脂平板
四号琼脂基础(No.4AgarBase)是一种用于微生物培养的固体培养基,主要用于霍乱弧菌的选择性分离培养。以下是它的一些关键特点和配制方法:1.**成分**:-蛋白胨:20.0g-牛肉膏粉:5.0g-氯化钠:5.0g-无水亚硫酸钠:3.0g-十二烷基硫酸钠:0.5g-猪胆汁粉:5.0g-雷佛奴尔:0.03g-庆大霉素:500U-琼脂:15.0g-pH值约为8.5±0.2(25℃)2.**用途**:用于霍乱弧菌的选择性分离培养。3.**配制方法**:-称取53.5g干粉,加入到1L蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-冷却至50-55℃时,每500mL培养基加入配套试剂1支(SR0080)(5mg亚碲酸钾),摇匀立即倾注平皿。-待凝固后备用。4.**检验原理**:-蛋白胨、牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子。-氯化钠维持均衡的渗透压。-亚硫酸钠可刺激弧菌生长。-柠檬酸钠、十二烷基硫酸钠、牛胆粉、利凡诺、庆大霉素和亚碲酸钾及较高的pH可抑制革兰氏阳性菌和部分革兰氏阴性杂菌。-霍乱弧菌对酸性环境比较敏感,因此该pH值可增强其生长。-琼脂是培养基的凝固剂。改良NBB琼脂平板
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